Përcaktimi i numrit të qelizave të mbjella në mjedise të dendura ushqyese (metoda e pllakave të Koch). Punimet e R. Koch dhe domethënia e tyre për mikrobiologjinë dhe patologjinë infektive Izolimi i një kulture të pastër aerobe Mikrobiologjia

Fazat kryesore në zhvillimin e mikrobiologjisë, virologjisë dhe imunologjisë

Këto përfshijnë sa vijon:

1.njohuri empirike(para shpikjes së mikroskopëve dhe përdorimit të tyre për të studiuar mikrobotën).

J. Fracastoro (1546) sugjeroi natyrën e gjallë të agjentëve të sëmundjeve infektive - contagium vivum.

2.Periudha morfologjike u deshën rreth dyqind vjet.

Anthony van Leeuwenhoek në 1675 përshkroi për herë të parë protozoarët, në 1683 - format kryesore të baktereve. Papërsosmëria e instrumenteve (zmadhimi maksimal i mikroskopëve X300) dhe metodat për studimin e mikrobotës nuk kontribuan në akumulimin e shpejtë të njohurive shkencore rreth mikroorganizmave.

3.Periudha fiziologjike(që nga viti 1875) - epoka e L. Pasteur dhe R. Koch.

L. Pasteur - studimi i bazave mikrobiologjike të proceseve të fermentimit dhe kalbjes, zhvillimi i mikrobiologjisë industriale, sqarimi i rolit të mikroorganizmave në qarkullimin e substancave në natyrë, zbulimi. anaerobe mikroorganizmat, zhvillimi i parimeve asepsi, metodat sterilizimi, zbutje ( zbutje)virulencës dhe marrja vaksinat (shtamet e vaksinave).

R. Koch - metoda e përzgjedhjes kulturat e pastra mbi mediat ushqyese të ngurta, metodat e ngjyrosjes së baktereve me ngjyra aniline, zbulimi i antraksit, kolerës ( Presja e Koch), tuberkulozi (shkopinj Koch), përmirësimi i teknikave të mikroskopisë. Arsyetimi eksperimental i kriterit Henle, i njohur si postulatet (triada) e Henle-Koch.

4.periudha imunologjike.

I.I. Mechnikov është një "poet i mikrobiologjisë" sipas përkufizimit figurativ të Emil Roux. Ai krijoi një epokë të re në mikrobiologji - doktrinën e imunitetit (imunitetit), duke zhvilluar teorinë e fagocitozës dhe duke vërtetuar teorinë qelizore të imunitetit.

Në të njëjtën kohë, u grumbulluan të dhëna për prodhimin në trup antitrupat kundër baktereve dhe të tyre toksinave e cila i lejoi P. Erlich të zhvillonte teorinë humorale të imunitetit. Në diskutimin e mëvonshëm afatgjatë dhe të frytshëm midis mbështetësve të teorive fagocitare dhe humorale, u zbuluan shumë mekanizma të imunitetit dhe lindi shkenca. imunologjisë.

Më vonë u zbulua se imuniteti trashëgues dhe i fituar varet nga aktiviteti i koordinuar i pesë sistemeve kryesore: makrofagët, komplementi, limfocitet T dhe B, interferonet, sistemi kryesor i histokompatibilitetit, duke siguruar forma të ndryshme të përgjigjes imune. I.I. Mechnikov dhe P. Erlich në 1908. iu dha çmimi Nobel.

12 shkurt 1892 në një takim të Akademisë Ruse të Shkencave, D.I. Ivanovsky raportoi se agjenti shkaktar i sëmundjes së mozaikut të duhanit është një virus i filtruar. Kjo datë mund të konsiderohet ditëlindje virologjisë, dhe D.I. Ivanovsky - themeluesi i saj. Më pas, rezultoi se viruset shkaktojnë sëmundje jo vetëm te bimët, por edhe te njerëzit, kafshët, madje edhe te bakteret. Megjithatë, vetëm pas përcaktimit të natyrës së gjenit dhe kodit gjenetik, viruset u klasifikuan si kafshë të egra.

5. Hapi tjetër i rëndësishëm në zhvillimin e mikrobiologjisë ishte zbulimi i antibiotikëve. Në vitin 1929 A. Fleming zbuloi penicilinën dhe filloi epoka e terapisë me antibiotikë, e cila çoi në përparimin revolucionar të mjekësisë. Më vonë doli se mikrobet përshtaten me antibiotikët dhe studimi i mekanizmave të rezistencës ndaj ilaçeve çoi në zbulimin e një të dytë gjenomi ekstrakromozomal (plazmid). bakteret.

Duke studiuar plazmidi treguan se janë organizma edhe më të thjeshtë se viruset, dhe ndryshe bakterofagët nuk i dëmtojnë bakteret, por i pajisin me veti biologjike shtesë. Zbulimi i plazmideve plotësoi ndjeshëm idetë për format e ekzistencës së jetës dhe mënyrat e mundshme të evolucionit të saj.

6. Moderne Faza gjenetike molekulare zhvillimi i mikrobiologjisë, virologjisë dhe imunologjisë filloi në gjysmën e dytë të shekullit të 20-të në lidhje me arritjet e gjenetikës dhe biologjisë molekulare, krijimin e mikroskopit elektronik.

Në eksperimentet mbi bakteret, u vërtetua roli i ADN-së në transmetimin e tipareve trashëgimore. Përdorimi i baktereve, viruseve dhe plazmideve të mëvonshme si objekte të kërkimit molekular biologjik dhe gjenetik çoi në një kuptim më të thellë të proceseve themelore që qëndrojnë në themel të jetës. Zbardhja e parimeve të kodimit të informacionit gjenetik në ADN-në e baktereve dhe vendosja e universalitetit të kodit gjenetik bëri të mundur kuptimin më të mirë të modeleve gjenetike molekulare të qenësishme në organizmat më të organizuar.

Deshifrimi i gjenomit të Escherichia coli ka bërë të mundur ndërtimin dhe transplantimin e gjeneve. Deri tani Inxhinieri gjenetike krijoi drejtime të reja bioteknologjia.

Është deshifruar organizimi gjenetik molekular i shumë viruseve dhe mekanizmat e ndërveprimit të tyre me qelizat, është vendosur aftësia e ADN-së virale për t'u integruar në gjenomën e një qelize të ndjeshme dhe mekanizmat kryesorë të kancerogjenezës virale.

Imunologjia ka pësuar një revolucion të vërtetë, duke shkuar përtej imunologjisë infektive dhe duke u bërë një nga disiplinat themelore mjekësore dhe biologjike më të rëndësishme. Deri më sot, imunologjia është një shkencë që studion jo vetëm mbrojtjen kundër infeksioneve. Në kuptimin modern Imunologjia është një shkencë që studion mekanizmat e vetëmbrojtjes së trupit nga gjithçka gjenetikisht e huaj, duke ruajtur integritetin strukturor dhe funksional të trupit.

Imunologjia aktualisht përfshin një sërë fushash të specializuara, ndër të cilat, së bashku me imunologjinë infektive, më të rëndësishmet përfshijnë imunogjenetikën, imunomorfologjinë, imunologjinë e transplantit, imunopatologjinë, imunohematologjinë, onkoimunologjinë, imunologjinë ontogjenezë, vaksinologjinë dhe imunodagnostifikimin e aplikuar.

Mikrobiologjia dhe virologjia si shkencat themelore biologjike përfshijnë gjithashtu një numër disiplinash të pavarura shkencore me qëllimet dhe objektivat e tyre: të përgjithshme, teknike (industriale), bujqësore, veterinare dhe më të rëndësishmet për njerëzimin. mikrobiologjisë mjekësore dhe virologjisë.

Mikrobiologjia dhe virologjia mjekësore studion patogjenët e sëmundjeve infektive të njeriut (morfologjinë, fiziologjinë, ekologjinë, karakteristikat e tyre biologjike dhe gjenetike), zhvillon metoda për kultivimin dhe identifikimin e tyre, metoda specifike për diagnostikimin, trajtimin dhe parandalimin e tyre.

Metoda Koch përdoret për të përcaktuar numrin e përgjithshëm të baktereve. Në një enë Petri bosh sterile, hidhni 1 ml të materialit të provës nga hollimi i duhur dhe derdhni 10 - 15 ml të shkrirë dhe të ftohur në 45 0 C MPA, përzieni me lëngun, duke e rrotulluar filxhanin në sipërfaqen e tavolinës.

Pas kultivimit të kulturave, numërohen kolonitë e rritura në sipërfaqe dhe në thellësi të agarit. Për ta bërë këtë, kupa vendoset me kokë poshtë në një sfond të zi, secila koloni e numëruar shënohet me një shënues në gotë. Vlerësoni vetëm ato pjata, të cilat u rritën nga 30 në 300 koloni. Nëse në pjatë janë rritur më shumë se 300 koloni dhe analiza nuk mund të përsëritet, atëherë kolonitë mund të numërohen nën ndriçim të fortë anësor duke përdorur një xham zmadhues dhe një pjatë të veçantë me një rrjet.

Numri i kolonive llogaritet në të paktën 20 katrorë 1 cm 2 në vende të ndryshme të pjatës. Është llogaritur numri mesatar i kolonive në 1 cm 2, i cili shumëzohet me sipërfaqen e gjellës.

Gjatë numërimit të kolonive, mund të përdoret një pajisje speciale për numërimin e baktereve, PSB.

Rezultati i numërimit të kolonive në çdo pjatë është numri i baktereve për 1 ml (cm 3) ose 1 g të materialit testues, duke marrë parasysh hollimin. Për numrin përfundimtar të baktereve, merret mesatarja aritmetike e rezultateve të numërimit të kolonive në pllaka me inokulim të dy hollimeve ngjitur.

Shembull: shumohen 10 -1 - 250 koloni, shumohen 10 -2 - 23 koloni.

Numri i përgjithshëm i baktereve = 250 x 10 + 23 x 100 / 2 = 2400 cfu / ml = 2,4 x 10 2 cfu / ml (njësi formuese koloni për 1 ml).

Rezultati i hulumtimit mund të rrumbullakoset në 2 - 3 shifra domethënëse.

Metoda e titrimit.

Përdoret për të përcaktuar numrin e PSD-ve.

Faza 1: homogjenizimi i materialit. Nëse është e nevojshme, përgatitja e një pezullimi për transferimin e mikroorganizmave në një fazë të lëngshme.

Faza e dytë: përgatitja e një sërë hollimesh.

Faza e 3-të: inokulimi i vëllimeve të zgjedhura të materialit testues (100, 10, 1 ml) dhe hollimet e tij prej 1 ml në një mjedis të lëngshëm ushqyes. Për të përmirësuar saktësinë e metodës, çdo vëllim mund të mbillet paralelisht në disa pjesë të mjedisit ushqyes (mbjellje me dy, tre, pesë rreshta). Optimale është një përsëritje e trefishtë (besueshmëri e mjaftueshme me një kosto relativisht të ulët).

Faza e 4: duke marrë parasysh praninë e rritjes në një mjedis ushqyes të lëngshëm dhe mbjelljen nga vëllime pozitive në një mjedis të ngurtë ushqyes.

Faza e 5-të: identifikimi i mikroorganizmave të rritur në një mjedis të ngurtë ushqyes. Në të njëjtën kohë, merren parasysh vetitë kulturore dhe, nëse është e nevojshme, kryhen studime shtesë (studimi i vetive tintoriale, morfologjike, biokimike dhe serologjike).

Nëse përdoret një metodë me një rresht të vetëm, rezultati zakonisht shprehet si titri i mikroorganizmit të synuar, i cili merret si vëllimi më i vogël (hollimi më i lartë) në të cilin është gjetur ende.

Nëse është përdorur një metodë me shumë rreshta, rezultatet regjistrohen duke përdorur tabela të veçanta që lejojnë, bazuar në kombinimin e vëllimeve pozitive që krijuan, të përcaktojnë titrin, indeksin (MP).

Ambiente të veçanta.

Në bakteriologji përdoren gjerësisht lëndët ushqyese të thata të prodhimit industrial, të cilat janë pluhurat higroskopik që përmbajnë të gjithë përbërësit e mediumit, përveç ujit. Për përgatitjen e tyre, përdoren tretje triptike të produkteve joushqimore të lira (mbetje peshku, miell mishi dhe kockash, kazeinë teknike). Ato janë të përshtatshme për transport, mund të ruhen për një kohë të gjatë, lehtësojnë laboratorët nga procesi i madh i përgatitjes së mediave dhe sjellin çështjen e standardizimit të mediave më afër zgjidhjes. Industria mjekësore prodhon media të thata të Endo, Levin, Ploskirev, agar sulfit bismut, agar ushqyes, karbohidrate me tregues BP dhe të tjera.

termostate

Termostatët përdoren për kultivimin e mikroorganizmave.

Një termostat është një pajisje që mban një temperaturë konstante. Pajisja përbëhet nga një ngrohës, një dhomë, mure të dyfishta midis të cilave qarkullon ajri ose uji. Temperatura kontrollohet nga një termostat. Temperatura optimale për riprodhimin e shumicës së mikroorganizmave është 37°C.

AKTIVITETI 7

TEMA: METODAT PËR IZOLIMIN E KULTURËS SË PASTËR AEROBIKE. FAZAT E IZOLIMIT TE NJE KULTURE TE PASTER TE BAKTEREVE AEROBIKE ME METODA TE SHKYRJES MEKANIKE

Plani i mësimit

1. Koncepti i "kulturës së pastër" të baktereve

2. Metodat për izolimin e kulturave të pastra me ndarje mekanike

3. Metodat biologjike për izolimin e kulturave të pastra

4. Metodat për identifikimin e baktereve

Qëllimi i mësimit: Të njohë studentët me metoda të ndryshme për izolimin e kulturave të pastra, të mësojë se si të bëhen të mbjella me lak, goditje, shpime.

Udhëzimet për demonstrimin

Në habitatin e tyre natyror, bakteret gjenden në shoqata. Për të përcaktuar vetitë e mikrobeve, rolin e tyre në zhvillimin e procesit patologjik, është e nevojshme të kemi baktere në formë popullatash homogjene (kultura të pastra). Një kulturë e pastër është një koleksion i individëve bakterialë të së njëjtës specie të rritur në një mjedis ushqyes.

Metodat për izolimin e kulturave të pastra të baktereve aerobe

Metoda Pasteur Metoda Koch Biologjike Fizike

(ka instalime elektrike historike)

Kuptimi)

Metoda Kimike

Shchukevich

Moderne

Mbjellje me lak Mbjellja me shpatull

(Metoda Drigalski)

Metodat për izolimin e kulturave të pastra:

1. Metodat e ndarjes mekanike bazohen në ndarjen e mikrobeve me fërkim të njëpasnjëshëm të materialit testues mbi sipërfaqen e agarit.

a) Metoda e Pasterit - ka rëndësi historike, parashikon hollimin sekuencial të materialit të provës në një mjedis ushqyes të lëngshëm me metodën e rrotullimit.

b) Metoda Koch - metoda e vendosjes së pllakave - bazohet në hollimin sekuencial të materialit testues me agar mish-pepton, i ndjekur nga derdhja e epruvetave me material të holluar në enët Petri.

c) Metoda e Drygalskit - kur mbillni material të mbjellë me bollëk me mikroflora, përdorni 2-3 gota për mbjellje të njëpasnjëshme me shpatull.

d) Mbjellja me lak në goditje paralele.

2. Metodat biologjike bazohen në vetitë biologjike të patogjenëve.

a) Biologjik - infeksion i kafshëve shumë të ndjeshme, ku mikrobet shumohen dhe grumbullohen me shpejtësi. Në disa raste, kjo metodë është e vetmja që ju lejon të izoloni kulturën e patogjenit nga një person i sëmurë (për shembull, me tularemi), në raste të tjera është më e ndjeshme (për shembull, izolimi i pneumokokut në minj të bardhë ose agjenti shkaktar i tuberkulozit te derrat gini).

b) Kimike – bazuar në rezistencën acidike të mykobaktereve. Për të çliruar materialin nga flora shoqëruese, ai
trajtohet me tretësirë ​​acidi. Vetëm bacilet e tuberkulozit do të rriten, pasi mikrobet tolerante ndaj acidit vriten nga acidi.

c) Metoda fizike bazohet në rezistencën e sporeve ndaj nxehtësisë. Për të izoluar kulturat e baktereve që formojnë spore nga
përzierjet, materiali nxehet në 80°C dhe inokulohet në një mjedis ushqyes. Vetëm bakteret spore do të rriten, sepse sporet e tyre mbetën të gjalla dhe dhanë rritje.

d) Metoda e Shukevich - bazuar në lëvizshmërinë e lartë të proteusit vulgar, të aftë për rritje zvarritëse.

Metoda e përgatitjes së pllakës së agarit

MPA shkrihet në një banjë uji, pastaj ftohet në 50-55°C. Qafa e shishkës digjet në flakën e një llambë alkooli, enët Petri hapen në mënyrë që qafa e shisheve të hyjë, pa prekur skajet e enës, derdhni 10-15 ml MPA, mbyllni kapakun, tundeni enën në mënyrë që mediumi të shpërndahet në mënyrë të barabartë, lëreni në një sipërfaqe horizontale derisa të ngurtësohet. Pas tharjes, pllakat me agar pjatë ruhen në të ftohtë.

Mbjellja e lakut

Merret një pikë materiali me një lak të ftohur steril, njëra skaj i kupës hapet pak me dorën e majtë, futet një lak brenda dhe bëhen disa goditje në skajin e kundërt në një vend, më pas laku shkëputet. dhe materiali inokulohet me goditje paralele nga një skaj i kupës në tjetrin me një interval prej 5-6 mm. Në fillim të mbjelljes, kur në lak do të ketë shumë mikrobe, ato do të japin rritje konfluente, por me çdo goditje të mikrobeve në lak, do të ketë gjithnjë e më pak mikrobe dhe ata do të mbeten të vetmuar dhe do të japin. kolonitë e izoluara.

Mbjellja sipas metodës Drygalski

Kjo metodë përdoret kur mbillet materiali i mbjellë me bollëk me mikroflora (qelb, feces, pështymë). Për mbjellje sipas metodës Drygalsky, merret një shpatull dhe disa gota (3-4). Një shpatull është një mjet i bërë nga tela metalike ose shigjetë qelqi, e përkulur në formën e një trekëndëshi ose në formë L. Materiali futet në filxhanin e parë me një lak ose pipetë dhe shpërndahet në mënyrë të barabartë me një shpatull mbi sipërfaqen e mediumit, me të njëjtën shpatull, pa e djegur, materiali fërkohet në mediumin ushqyes në filxhanin e dytë dhe më pas. në të tretën. Me këtë inokulim, pllaka e parë do të ketë rritje konfluente, dhe kolonitë e izoluara do të rriten në pllakat pasuese.

Njihen relativisht pak metoda për izolimin e baktereve si kultura të pastra. Kjo bëhet më së shpeshti duke izoluar qelizat e vetme në media të ngurta të rritjes duke përdorur metodën e inokulimit me brez ose duke derdhur një sasi të vogël kulture të lëngshme në pllaka ( metoda e hollimit). Sidoqoftë, marrja e një kolonie të veçantë nuk garanton gjithmonë pastërtinë e kulturës, pasi kolonitë mund të rriten jo vetëm nga qelizat individuale, por edhe nga grupimet e tyre. Nëse mikroorganizmat formojnë mukus, atëherë format e huaja shpesh i bashkëngjiten asaj. Për pastrim, preferohet të përdoret një medium jo selektiv (MPA) sepse ndotësit rriten më mirë në të dhe zbulohen më lehtë.

Marrja e kolonive të izoluara në një mjedis të ngurtë ushqyes arrihet ose duke shoshitur një suspension të mikroorganizmave me një shpatull ( Metoda Koch), ose me ndihmën e një laku bakteriologjik ( metoda e goditjes dobësuese). Si rezultat i ndarjes mekanike të qelizave mikrobike, secila prej tyre mund të krijojë një koloni të izoluar të një specie mikrobike.

Sitë me një shpatull (metoda Koch) prodhuar në sekuencën e mëposhtme:

1) një pikë e kulturës së pasurimit aplikohet në sipërfaqen e mediumit ushqyes në filxhanin nr. 1 me një pipetë sterile dhe shpërndahet me një shpatull sterile;

2) shpatula nxirret jashtë, filxhani mbyllet shpejt dhe spatula kalohet në filxhanin nr.2 pa e sterilizuar. Simuloni shpërndarjen e kulturës në të gjithë sipërfaqen e mediumit duke prekur sipërfaqen e tij me të njëjtën anë të shpatullës që është përdorur më parë për shpërndarjen e kampionit;

3) saktësisht të njëjtat veprime kryhen në kupën nr. 3, pas së cilës spatula sterilizohet;

4) kupat me fara vendosen në një termostat dhe inkubohen në temperaturën optimale.

Pas një kohe të caktuar, kupat hiqen nga termostati dhe studiohet rritja e mikroorganizmave. Zakonisht, në pjatën nr.1 vërehet një rritje e vazhdueshme e baktereve, në pjatat pasuese vërehen koloni.

Sitë me lak (metoda e goditjes së varfëruar) përfshin inokulimin e një laku bakteriologjik nga një kulturë pasurimi në sipërfaqen e një mjedisi agar në enët Petri. Në fazën e parë, një lak me kulturën aplikohet me një sërë goditjesh paralele në mjedisin e agarit (Figura 4.2, A). Laku sterilizohet, ftohet në pjesën e painokuluar të mediumit të agarit dhe vizatohet një seri goditjesh në drejtimin pingul me të parin (Figura 4.2, B). Pastaj laku sterilizohet përsëri, ftohet dhe goditjet aplikohen në drejtim NË(Figura 4.2), dhe pas sterilizimit të radhës - në drejtim G(Figura 4.2). Kupat vendosen në një termostat dhe pas një kohe të caktuar merren parasysh rezultatet. Zakonisht në goditje A Dhe B rritet një numër i madh i kolonive (nganjëherë rritje e vazhdueshme), ndërsa në goditje NË Dhe G formohen koloni të izoluara.

Figura 4.2 - Skema e sitës së baktereve me goditje për të marrë koloni të izoluara

Hollimet serike në media të ngurta- metoda më e thjeshtë e inokulimit të pllakave, e cila konsiston në faktin se pas inokulimit të kampionit në një epruvetë me agar steril të shkrirë dhe të ftohur, mediumi përzihet, derdhet në një enë Petri dhe lihet të ngurtësohet. Për të përftuar koloni të izoluara mirë, përgatitet një sërë hollimesh të njëpasnjëshme dhjetëfish dhe menjëherë në enë shtohen 1 ml mostra, shtohen 15–20 ml mjedis agar të shkrirë dhe përzihen duke tundur enën. Ndonjëherë kolonitë individuale zhyten në agar dhe mund të hiqen vetëm mekanikisht. Është gjithashtu e keqe që bakteret janë në mjedis në temperaturën e agarit të shkrirë për ca kohë.

Nëse, në bazë të simptomave të caktuara në bimë dhe rezultateve të ekzaminimit mikroskopik, dyshohet se shkaktari i sëmundjes është një bakter, hapi tjetër duhet të jetë izolimi i tij.

Në këtë rast, supozohet se patogjeni është i kontaminuar me organizma të lidhur, d.m.th., ekziston një popullatë e përzier. Për të marrë patogjenin si një koloni të veçantë në rritje, macerati i indeve duhet të vendoset në medium.

Mbjellja e goditjes. Me një lak të kalcinuar të vaksinimit merret një sasi e vogël macerati i indeve bimore që përmban baktere dhe me lëvizje të lehta, pa dëmtuar sipërfaqen e agarit, aplikohet në mjedisin ushqyes të përgatitur me 4-6 goditje. Pas rindezjes së lakut, kupa me mediumin kthehet 90 ° në të djathtë dhe më pas aplikohen 4-6 goditje të tjera nga goditja e dytë, gjilpëra ndizet përsëri dhe kryhet inokulimi i tretë. Kështu arrihet një hollim i tillë i materialit fillestar, në të cilin bakteret, pas inkubimit në një termostat për 48-72 orë në 28 ° C, formojnë koloni të veçanta të formave dhe ngjyrave të ndryshme. Kolonitë më pas transferohen për studime të mëtejshme në tuba agar të pjerrët. Një koloni merret me një lak të kalcinuar dhe, me një lëvizje të kujdesshme në formën e një gjarpri ose zigzag, aplikohet në agar ushqyes.

Metoda e derdhjes Koch. Metoda e derdhjes Koch siguron që çdo koloni të formohet nga një qelizë e vetme bakteriale. Është mirë që materiali fillestar të pezullohet në ujë steril dhe të aplikohet metoda Koch vetëm me këtë hollim. Një sasi e vogël e suspensionit transferohet në epruvetën e parë me një lëndë ushqyese të ftohur në 60 °C. Pastaj përmbajtja e tubit përzihet me inokulumin duke e rrotulluar atë midis pëllëmbëve. Më pas, merrni epruvetën e dytë, hapeni me kujdes mbi flakën e djegësit dhe transferoni tre pjesë të substratit në të nga provëza e parë me sythe të mëdha. Përmbajtja e epruvetës pas shkrepjes së qafës dhe tapës derdhet në enën e parë Petri, duke hapur pak kapakun e filxhanit sa për të futur qafën e epruvetës nën të. Menjëherë pas derdhjes, kupa mbyllet dhe lënda ushqyese shpërndahet në mënyrë të barabartë me lëvizje të kujdesshme.

Pasi të keni përzier plotësisht përmbajtjen e epruvetës së dytë, merrni epruvetën e tretë dhe kaloni gjashtë pjesë të substratit në të me një lak nga e dyta. Përmbajtja e epruvetës hidhet në një filxhan dhe përmbajtja e epruvetës, pas përzierjes, hidhet në një filxhan. Kupat me medium inkubohen në një termostat në 28°C, pas disa ditësh bakteret që përmbahen në lëndën fillestare formojnë koloni.

Mbarështimi serik. Nëse, për shembull, është e nevojshme të izolohen bakteret nga toka, atëherë përdoret hollimi serik. Mjeti ushqyes steril (15 ml për pjatë) derdhet në enë, 0,1 ml nga tre hollimet e fundit të suspensionit aplikohen në agarin e ngurtësuar dhe shpërndahen mbi sipërfaqe me një shpatull xhami.

Për të izoluar bakteret, 1 g tokë pezullohet në 9 ml ujë, tundet mirë, lihet të qëndrojë për disa sekonda dhe nga suspensioni përgatiten hollime serike. Me këtë metodë mund të përcaktohet numri i mikroorganizmave në çdo mostër.

Nëse gjeni një gabim, ju lutemi theksoni një pjesë të tekstit dhe klikoni Ctrl+Enter.