Қатты қоректік ортаға себу арқылы жасушалардың санын анықтау (Кох пластина әдісі). Р.Кохтың еңбектері және олардың микробиология және инфекциялық патология үшін маңызы Аэробтар микробиологиясының таза дақылын бөліп алу.

Микробиология, вирусология және иммунология дамуының негізгі кезеңдері

Оларға мыналар жатады:

1.Эмпирикалық білім(микроскоптар ойлап табылғанға дейін және олардың микроәлемді зерттеу үшін қолданылуы).

Дж.Фракасторо (1546) жұқпалы аурулардың қоздырғыштары – contagium vivum тірі табиғатын ұсынды.

2.Морфологиялық кезеңекі жүз жылдай уақыт кетті.

Антони ван Левенгук 1675 ж алғаш рет қарапайымдылар, 1683 жылы - бактериялардың негізгі формалары сипатталды. Құралдардың жетілмегендігі (X300 микроскоптарының максималды үлкейтуі) және микроәлемді зерттеу әдістері микроорганизмдер туралы ғылыми білімдердің тез жинақталуына ықпал етпеді.

3.Физиологиялық кезең(1875 жылдан) – Л.Пастер мен Р.Кох дәуірі.

Л.Пастер – ашыту және ыдырау процестерінің микробиологиялық негіздерін зерттеу, өнеркәсіптік микробиологияны дамыту, микроорганизмдердің табиғаттағы заттардың айналымындағы рөлін түсіндіру, ашу. анаэробтымикроорганизмдер, принциптерін дамыту асептика,әдістері зарарсыздандыру,әлсіреу ( әлсіреу)вируленттілігіжәне қабылдау вакциналар (вакциналық штаммдар).

Р.Кох – оқшаулау әдісі таза мәдениеттерқатты қоректік орталарда, бактерияларды анилиндік бояулармен бояу әдістері, күйдіргі, тырысқақ қоздырғыштарын табу ( Кох үтірі), туберкулез (Кох таяқшалары),микроскопия технологиясын жетілдіру. Генле-Кох постулаттары (триада) деп аталатын Генле критерийлерін эксперименттік негіздеу.

4.Иммунологиялық кезең.

И.И.Мечников Эмиль Рудың бейнелі анықтамасы бойынша «микробиология ақыны». Ол микробиологияда жаңа дәуірді – иммунитет (иммунитет) туралы ілімді жасап, фагоцитоз теориясын дамытып, иммунитеттің жасушалық теориясын негіздеді.

Сонымен бірге ағзадағы өндіріс туралы деректер жинақталды антиденелербактерияларға және оларға қарсы токсиндер,бұл П.Эрлихке иммунитеттің гуморальдық теориясын дамытуға мүмкіндік берді. Фагоцитарлық және гуморальдық теорияларды жақтаушылар арасындағы кейінгі ұзақ және жемісті пікірталаста иммунитеттің көптеген механизмдері ашылып, ғылым дүниеге келді. иммунология.

Кейінірек тұқым қуалайтын және жүре пайда болған иммунитет бес негізгі жүйенің: макрофагтардың, комплементтің, Т- және В-лимфоциттердің, интерферондардың, иммундық жауаптың әртүрлі формаларын қамтамасыз ететін негізгі гистосәйкестік жүйесінің үйлестірілген белсенділігіне байланысты екені анықталды. И.И.Мечников пен П.Эрлих 1908 ж. Нобель сыйлығы берілді.

1892 жылы 12 ақпан Ресей ғылым академиясының мәжілісінде Д.И.Ивановский темекі мозаикалық ауруының қоздырғышы сүзілетін вирус екенін хабарлады. Бұл күнді туған күн деп санауға болады вирусология, ал оның негізін қалаушы Д.И.Ивановский. Кейіннен вирустар өсімдіктерде ғана емес, адамдарда, жануарларда, тіпті бактерияларда да ауру тудыратыны белгілі болды. Бірақ геннің табиғаты мен генетикалық код анықталғаннан кейін ғана вирустар тірі табиғатқа жатқызылды.

5. Микробиологияның дамуының келесі маңызды кезеңі болды антибиотиктердің ашылуы. 1929 жылы А.Флеминг пенициллинді ашты және антибиотикалық терапия дәуірі басталды, бұл медицинада революциялық прогреске әкелді. Кейінірек микробтардың антибиотиктерге бейімделетіні белгілі болды, ал дәріге төзімділік механизмдерін зерттеу екінші хромосомадан тыс (плазмидалық) геномбактериялар.

Зерттеу плазмидаларолардың вирустарға қарағанда қарапайым құрылымды организмдер екенін көрсетті және олардан айырмашылығы бактериофагтарбактерияларға зиян келтірмейді, бірақ оларға қосымша биологиялық қасиеттер береді. Плазмидалардың ашылуы өмірдің өмір сүру формалары және оның эволюциясының мүмкін жолдары туралы түсінікті айтарлықтай кеңейтті.

6. Заманауи молекулалық-генетикалық кезеңМикробиология, вирусология және иммунологияның дамуы 20 ғасырдың екінші жартысында генетика мен молекулалық биологияның жетістіктеріне және электронды микроскоптың жасалуына байланысты басталды.

Бактерияларға жүргізілген тәжірибелер тұқым қуалайтын белгілерді берудегі ДНҚ рөлін дәлелдеді. Бактерияларды, вирустарды және кейінірек плазмидаларды молекулалық биология мен генетикалық зерттеулердің объектілері ретінде пайдалану тіршіліктің негізінде жатқан іргелі процестерді тереңірек түсінуге әкелді. Бактериялық ДНҚ-дағы генетикалық ақпаратты кодтау принциптерін нақтылау және генетикалық кодтың әмбебаптығын белгілеу жоғары деңгейде ұйымдастырылған организмдерге тән молекулалық-генетикалық заңдылықтарды жақсы түсінуге мүмкіндік берді.

Escherichia coli геномын декодтау гендерді жобалауға және трансплантациялауға мүмкіндік берді. Әзірге Генетикалық инженерияжаңа бағыттарды қалыптастырды биотехнология.

Көптеген вирустардың молекулалық-генетикалық ұйымы және олардың жасушалармен әрекеттесу механизмдері ашылды, вирустық ДНҚ-ның сезімтал жасуша геномына қосылу қабілеті және вирустық канцерогенездің негізгі механизмдері анықталды.

Иммунология нағыз төңкеріске ұшырап, инфекциялық иммунологияның шеңберінен шығып, маңызды іргелі медициналық және биологиялық пәндердің біріне айналды. Бүгінгі күні иммунология инфекциялардан қорғауды ғана емес зерттейтін ғылым. Қазіргі мағынада Иммунология – организмнің құрылымдық және функционалдық тұтастығын сақтай отырып, генетикалық бөтен нәрселерден организмнің өзін-өзі қорғау механизмдерін зерттейтін ғылым.

Қазіргі уақытта иммунология бірқатар мамандандырылған бағыттарды қамтиды, олардың ішінде инфекциялық иммунологиямен қатар ең маңыздыларына иммуногенетика, иммуноморфология, трансплантациялық иммунология, иммунопатология, иммуногематология, онкоиммунология, онтогенез иммунологиясы, вакцинология және қолданбалы иммунодиагностика жатады.

Микробиология және вирусология сияқты негізгі биология ғылымдарысонымен қатар өз мақсаттары мен міндеттері бар бірқатар дербес ғылыми пәндерді қамтиды: жалпы, техникалық (өндірістік), ауыл шаруашылығы, ветеринариялық және ең жоғары мәнадамзат үшін медициналық микробиология және вирусология.

Медициналық микробиология және вирусология адамның жұқпалы ауруларының қоздырғыштарын (олардың морфологиясын, физиологиясын, экологиясын, биологиялық және генетикалық ерекшеліктерін) зерттейді, оларды өсіру және идентификациялау әдістерін, оларды диагностикалау, емдеу және алдын алудың нақты әдістерін әзірлейді.

Бактериялардың жалпы санын анықтау үшін Кох әдісі қолданылады. Тиісті сұйылтудан алынған 1 мл зерттелетін материал бос стерильді Петри табақшасына құйылады және 10 - 15 мл балқытылған және 45 0 С-қа дейін салқындатылған МПА құйылады, сұйықтықпен араластырылады, ыдысты үстел бетінде айналдырады.

Дақылдарды өңдегеннен кейін агардың бетінде және тереңдігінде өскен колониялар есептеледі. Ол үшін кесе қара фонда төңкеріліп қойылады, әрбір саналған колония стақанға маркермен белгіленеді. Тек 30-дан 300-ге дейін колония өскен тақталар ғана бағаланды. Егер пластинада 300-ден астам колония өскен болса және талдауды қайталау мүмкін болмаса, онда колонияларды ұлғайтқыш әйнек пен торы бар арнайы пластинаның көмегімен күшті бүйірлік жарықтандыру кезінде санауға болады.

Колониялар саны пластинаның әртүрлі жерлерінде ауданы 1 см 2 кем дегенде 20 шаршыда есептеледі. 1 см2 колониялардың орташа саны есептеледі және ыдыстың ауданына көбейтіледі.

Колонияларды санау кезінде арнайы бактерияларды санау құрылғысы - PSB қолдануға болады.

Әрбір ыдыстағы колонияларды санау нәтижесі сұйылтуды ескере отырып, зерттелетін материалдың 1 мл (см 3) немесе 1 г бактериялар саны болып табылады. Бактериялардың соңғы саны көршілес екі сұйылтумен егілген пластиналардағы колонияларды санау нәтижелерінің орташа арифметикалық мәні ретінде қабылданады.

Мысалы:сұйылту 10 -1 - 250 колония, сұйылту 10 -2 - 23 колония.

Бактериялардың жалпы саны = 250 x 10 + 23 x 100 / 2 = 2400 cfu/ml = 2,4 x 10 2 cfu/ml (мл-ге колония құрайтын бірлік).

Зерттеу нәтижесін 2 - 3 маңызды цифрға дейін дөңгелектеуге болады.

Титрлеу әдісі.

SPM санын анықтау үшін қолданылады.

1-кезең:материалды гомогенизациялау. Қажет болса, микроорганизмдерді сұйық фазаға көшіру үшін суспензия дайындаңыз.

2-кезең:сұйылтулар сериясын дайындау.

3-кезең:зерттелетін материалдың таңдалған көлемін (100, 10, 1 мл) және оның 1 мл сұйылтуларын сұйық қоректік ортаға себу. Әдістің дәлдігін арттыру үшін әрбір көлемді қоректік ортаның бірнеше порцияларына параллель егуге болады (екі, үш, бес қатарлы себу). Оңтайлы - үш еселік қайталау (салыстырмалы түрде төмен бағамен жеткілікті сенімділік).

4-кезең:сұйық қоректік ортада өсудің болуын және оң көлемдерден қатты қоректік ортаға себуді ескере отырып.

5-кезең:қатты қоректік ортада өскен микроорганизмдерді анықтау. Бұл жағдайда мәдени қасиеттер есепке алынады және қажет болған жағдайда қосымша зерттеулер жүргізіледі (тинкториалды, морфологиялық, биохимиялық және серологиялық қасиеттерін зерттеу).

Егер бір қатарлы әдіс қолданылса, әдетте, нәтиже қажетті микроорганизмнің титрі түрінде көрсетіледі, ол әлі де анықталған ең аз көлем (ең жоғары сұйылту) ретінде қабылданады.

Егер көп қатарлы әдіс қолданылса, нәтижелер өсуді қамтамасыз еткен оң көлемді біріктіру негізінде титрді немесе индексті (TNI) анықтауға мүмкіндік беретін арнайы кестелер арқылы жазылады.

Арнайы орталар.

Бактериологияда құрғақ қоректік ортасудан басқа ортаның барлық компоненттерін қамтитын гигроскопиялық ұнтақтар болып табылатын өнеркәсіптік өндіріс. Оларды дайындау үшін арзан азық-түлік емес өнімдердің (балық қалдықтары, ет және сүйек ұны, техникалық казеин) триптикалық дайджесттері қолданылады. Олар тасымалдауға ыңғайлы, ұзақ уақыт сақталуы мүмкін, зертханаларды тасымалдаушыларды дайындаудың орасан зор процесінен босатады және оларды БАҚ стандарттау мәселесін шешуге жақындатады. Медицина өнеркәсібі құрғақ қоректік орталарды Эндо, Левин, Плоскирев, висмут сульфитті агар, қоректік агар, АҚ индикаторы бар көмірсулар және т.б.

Термостаттар

Термостат микроорганизмдерді өсіру үшін қолданылады.

Термостат - тұрақты температураны ұстап тұратын құрылғы. Құрылғы қыздырғыштан, камерадан, қос қабырғалардан тұрады, олардың арасында ауа немесе су айналады. Температура термостат арқылы реттеледі. Көптеген микроорганизмдердің көбеюі үшін оңтайлы температура 37 ° C құрайды.

7-САБАҚ

ТАҚЫРЫП: АЭРОБТАРДЫҢ ТАЗА МӘДЕНИЕТІН ОЛАҚТАУ ӘДІСТЕРІ. МЕХАНИКАЛЫҚ ДИССОЦИАЦИЯЛЫҚ ӘДІСІ БОЙЫНША АЭРОБТЫ БАКТЕРИЯЛАРДЫҢ ТАЗА МӘДЕНИЕТІН ОЛАҚТАУ ҚАДЫНДАРЫ.

Сабақ жоспары

1. Бактериялардың «таза дақылы» туралы түсінік

2. Таза дақылдарды механикалық бөлу арқылы бөліп алу әдістері

3. Таза дақылдарды бөліп алудың биологиялық әдістері

4. Бактерияларды анықтау әдістері

Сабақтың мақсаты:Студенттерді таза дақылдарды бөліп алудың әртүрлі әдістерімен таныстыру, ілмекпен, штрихпен, инъекциямен себуді үйрету.

Демонстрацияға әдістемелік нұсқаулар

Табиғи ортада бактериялар ассоциацияларда кездеседі. Микробтардың қасиеттерін және олардың патологиялық процестің дамуындағы рөлін анықтау үшін біртекті популяциялар (таза дақылдар) түріндегі бактериялар болуы керек. Таза дақыл – қоректік ортада өсірілген бір түрдегі бактериялардың жиынтығы.

Аэробты бактериялардың таза дақылдарын бөліп алу әдістері

Пастер әдісі Кох әдісі Биологиялық физикалық

(тарихи (тақта сымдары) бар)

Мағынасы)

Химиялық әдіс

Щукевич

Қазіргі заманғы

Ілмекпен себу Шпательмен себу

(Дригальский әдісі)

Таза дақылдарды оқшаулау әдістері:

1. Механикалық бөлу әдістері зерттелетін материалды агардың бетіне ретімен үйкеу арқылы микробтарды бөлуге негізделген.

а) Пастер әдісі – тарихи маңызы бар, прокат әдісімен сұйық қоректік ортада зерттелетін материалды дәйекті сұйылтуды қарастырады

б) Кох әдісі – пластина әдісі – зерттелетін материалды ет пептонды агарымен ретімен сұйылтуға, содан кейін сұйылтылған материалы бар пробиркаларды Петри табақшаларына құюға негізделген.

в) Дригальский әдісі – микрофлораға мол себілген материалды себу кезінде шпательмен ретімен себу үшін 2-3 кесе қолданылады.

г) Параллельді штрихтарда ілмекпен себу.

2. Биологиялық әдістер негізделген биологиялық қасиеттеріпатогендер.

а) Биологиялық – микробтар тез көбейіп, жиналатын өте сезімтал жануарлардың инфекциясы. Кейбір жағдайларда бұл әдіс ауру адамнан қоздырғыш культурасын бөліп алуға мүмкіндік беретін жалғыз әдіс (мысалы, туляремиямен), басқа жағдайларда ол сезімталырақ (мысалы, ақ тышқандарда пневмококкты оқшаулау немесе теңіз шошқаларының туберкулезінің қоздырғышы).

б) Химиялық – микобактериялардың қышқылға төзімділігіне негізделген. Материалды ілеспе флорадан босату үшін, ол
қышқыл ерітіндісімен өңделеді. Тек туберкулез таяқшалары өседі, өйткені қышқылға төзімді микробтар қышқылдың әсерінен өледі.

в) Физикалық әдіс споралардың ыстыққа төзімділігіне негізделген. Спора түзетін бактериялардың дақылын бөліп алу
қоспалар, материал 80°C температурада қызады және қоректік ортаға егіледі. Тек споралы бактериялар өседі, өйткені олардың споралары тірі қалды және өсуге себеп болды.

г) Щукевич әдісі – протей вульгарисінің жоғары қозғалғыштығына негізделген, сусымалы өсінді шығаруға қабілетті.

Пластиналы агарды дайындау әдісі

МПА су моншасында балқытады, содан кейін 50-55°С дейін салқындатылады. Бөтелкенің мойнын спирт шамының жалынына жағып, Петри табақшаларын ыдыстың шетіне тигізбей бөтелкенің мойыны сыйатындай етіп ашады, 10-15 мл МПА құйылады, қақпағы жабық, ыдысты орта біркелкі таралатындай етіп шайқап, қатайғанша көлденең бетке қалдырады. Кептіруден кейін пластиналық агар пластиналарын суықта сақтайды.

Ілмек себу

Залалсыздандырылған салқындатылған ілмекті пайдаланып, бір тамшы материалды алыңыз, сол қолыңызбен шыныаяқтың бір шетін ашыңыз, ілмекті ішке кіргізіңіз және қарама-қарсы шетіндегі ілмекпен бір жерде бірнеше штрих жасаңыз, содан кейін ілмекті жұлып алыңыз және егіңіз. материал шыныаяқтың бір шетінен екіншісіне 5-6 мм аралықпен параллельді соққылармен. Егістің басында, ілмекте микробтар көп болғанда, олар біріктірілген өсінді береді, бірақ әрбір инсульт сайын ілмекте микробтар азайып, олар жалғыз қалады және оқшауланған колониялар жасайды.

Дригалский әдісі бойынша себу

Бұл әдіс микрофлорамен (ірің, нәжіс, қақырық) қатты ластанған материалды егу кезінде қолданылады. Дригалский әдісімен себу үшін шпатель мен бірнеше кесе (3-4) алыңыз. Шпатель - үшбұрыш немесе L-тәрізді етіп иілген металл сымнан немесе шыны жебеден жасалған құрал. Материалды ілмекпен немесе пипеткамен бірінші шыныаяққа енгізеді және ортаның бетіне шпательмен біркелкі таратады; сол шпательмен оны күйдірмей, екінші шыныаяқтағы қоректік ортаға материалды ысқылайды, содан кейін үшіншісінде. Мұндай себу кезінде бірінші тостаған біріктірілген өсімге ие болады, ал кейінгі шыныаяқтарда оқшауланған колониялар өседі.

Бактерияларды таза дақыл ретінде бөліп алудың салыстырмалы түрде аз әдістері белгілі. Бұл көбінесе қатты қоректік ортада жеке жасушаларды оқшаулау, жолақпен қаптау әдісін қолдану немесе сұйық культураның аз мөлшерін пластиналарға құю арқылы жасалады ( шектеуші сұйылту әдісі). Дегенмен, жеке колония алу әрқашан дақылдың тазалығына кепілдік бермейді, өйткені колониялар жеке жасушалардан ғана емес, сонымен қатар олардың кластерлерінен де өсе алады. Егер микроорганизмдер шырышты түзсе, онда оған бөтен формалар жиі қосылады. Тазарту үшін селективті емес ортаны (NSM) қолданған дұрыс, өйткені ластаушы микроорганизмдер онда жақсы өседі және оңайырақ анықталады.

Қатты қоректік ортада оқшауланған колонияларды алу микроорганизмдердің суспензиясын шпательмен елеуі арқылы жүзеге асырылады ( Кох әдісі) немесе бактериологиялық ілмекті пайдалану ( сарқылу инсульт әдісі). Микроорганизм жасушаларының механикалық бөлінуі нәтижесінде олардың әрқайсысы микробтардың бір түрінің оқшауланған колониясын тудыруы мүмкін.

Шпательмен елеуіш (Кох әдісі)келесі ретпен өндіріледі:

1) стерильді пипеткамен No1 ыдыстағы қоректік ортаның бетіне байыту культурасының бір тамшысы жағылады және стерильді шпательмен таратылады;

2) шпательді алып, тостағанды ​​тез жауып, шпательді зарарсыздандырмай No2 кесеге ауыстырыңыз. Ортаның бүкіл бетіне культураның таралуын оның бетіне үлгіні тарату үшін бұрын қолданылған шпательдің сол жағымен тигізу арқылы модельдеңіз;

3) дәл осындай әрекеттер No3 кеседе жүргізіледі, содан кейін шпатель зарарсыздандырылады;

4) себілген ыдыстар термостатқа салынып, оңтайлы температурада инкубацияланады.

Белгілі бір уақыттан кейін шыныаяқтар термостаттан алынып, микроорганизмдердің өсуі зерттеледі. Әдетте №1 тостағаншада бактериялардың үздіксіз өсуі байқалады, ал келесі кеселерде колониялар байқалады.

Ілмекті елеуіш (ағызу жолағы әдісі)Петри табақшаларындағы агар ортасының бетіне байыту мәдениетінен бактериологиялық ілмекті себуді қамтиды. Бірінші кезеңде культурасы бар ілмекті пайдаланып агар ортасына параллельді соққылар сериясы қолданылады (4.2-сурет, А). Ілмек зарарсыздандырылады, агар ортасының егілмеген бөлігіне салқындатылады және біріншілерге перпендикуляр бағытта бірнеше соққылар жасалады (4.2-сурет, Б). Содан кейін цикл қайтадан зарарсыздандырылады, салқындатылады және бағытта соққылар қолданылады IN(4.2-сурет), ал келесі зарарсыздандырудан кейін – бағыт бойынша Г(4.2-сурет). Шыныаяқтар термостатқа салынып, белгілі бір уақыттан кейін нәтижелер ескеріледі. Әдетте соққыларда АЖәне Бөседі үлкен санколониялар (кейде үздіксіз өсу), жолақтарда INЖәне Гоқшауланған колониялар түзіледі.

4.2-сурет – Оқшауланған колонияларды алу үшін бактерияларды жолақты елеуіш схемасы

Қатты ортадағы сериялық сұйылтулар- пластиналарды егудің ең қарапайым әдісі, ол үлгіні стерильді балқытылған және салқындатылған агары бар пробиркаға егілгеннен кейін ортаны араластырып, Петри табақшасына құйып, қатайтуға мүмкіндік береді. Жақсы оқшауланған колонияларды алу үшін бірінен соң бірі он есе сұйылтулар сериясын дайындаңыз және шыныаяққа 1 мл үлгілерді қосыңыз, 15-20 мл балқытылған агар ортасын қосыңыз және шыныаяқты шайқау арқылы араластырыңыз. Кейде жеке колониялар агарға батырылады және оларды тек механикалық жолмен жоюға болады. Бактериялардың балқытылған агардың температурасындағы ортада біраз уақыт болуы да жаман.

Егер өсімдіктердегі белгілі бір белгілерге және микроскопиялық зерттеу нәтижелеріне сүйене отырып, аурудың қоздырғышы бактерия деп күдіктенсе, келесі қадам оны оқшаулау болуы керек.

Бұл жағдайда қоздырғыш ілеспе организмдермен ластанған деп болжанады, яғни аралас популяция бар. Қоздырғышты бөлек өсіп келе жатқан колония түрінде алу үшін тіндік мацератты ортаға жолақпен салу керек.

Жанасу арқылы себу. Кальциленген егу ілмегін пайдаланып, құрамында бактериялар бар өсімдік ұлпасының мацератының аз мөлшерін алып, агар бетін зақымдамай, жеңіл қозғалыстармен дайындалған қоректік ортаға 4-6 рет жағыңыз. Ілмекті қайта күйдіріп, қоректік ортасы бар тостағанды ​​90° оңға бұрады, содан кейін екінші штрихтан тағы 4-6 штрих қояды, инені қайтадан күйдіреді және үшінші себуді жүргізеді. Бұл бастапқы материалды сұйылтуға қол жеткізеді, осылайша бактериялар термостатта 48-72 сағат бойы 28 °C температурада инкубациялаудан кейін әртүрлі пішіндер мен түстердің жеке колонияларын құрайды. Содан кейін колониялар қосымша зерттеу үшін агар көлбеу түтіктерге ауыстырылады. Кальциленген ілмекті пайдаланып, колонияны алыңыз және оны қоректік агарға жылан немесе зигзаг түрінде мұқият қозғалыспен жағыңыз.

Кохты құю әдісі. Кох пластинасының әдісі әрбір колонияның бір бактерия жасушасынан түзілуін қамтамасыз етеді. Бастапқы материалдан суспензияны стерильді суда дайындап, Кох әдісін тек осы сұйылтумен қолданған дұрыс. Суспензияның аз мөлшері 60 °С дейін салқындатылған қоректік ортасы бар бірінші пробиркаға жіберіледі. Содан кейін түтіктің ішіндегісін алақан арасында айналдыру арқылы егумен араластырады. Содан кейін екінші пробирканы алып, оны оттық жалынының үстінен абайлап ашыңыз және оған бірінші пробиркадан субстраттың үш бөлігін үлкен ілмектерді қолданыңыз. Мойын мен тығынды күйдіргеннен кейін пробирканың ішіндегісін бірінші Петри табақшасына құйып, оның астына пробирканың мойнын кіргізетіндей етіп ыдыстың қақпағын ашады. Құйғаннан кейін бірден шыныаяқты жабыңыз және қоректік ортаны мұқият біркелкі таратыңыз.

Екінші пробирканың мазмұнын мұқият араластырып, үшінші пробирканы алып, субстраттың алты бөлігін екінші пробиркадан ілмекпен оған ауыстырыңыз. Пробирканың ішіндегісін шыныаяққа құяды, ал пробирканың ішіндегісін араластырғаннан кейін шыныаяққа құяды. Қоректік ортасы бар ыдыстар термостатта 28°C температурада инкубацияланады, бірнеше күннен кейін бастапқы материалдағы бактериялар колониялар түзеді.

Сериялық өсіру. Егер, мысалы, топырақтан бактерияларды бөліп алу қажет болса, онда сериялық сұйылту қолданылады. Стерильді қоректік орта (бір кесеге 15 мл) шыныаяқтарға құйылады, 0,1 мл суспензияның соңғы үш сұйылтуынан қатайтылған агарға жағылады және шыны шпательмен бетіне жағылады.

Бактерияларды бөліп алу үшін 1 г топырақты 9 мл суға суспензияға салады, жақсылап шайқайды, бірнеше секундқа тұндырады, суспензиядан сериялық сұйылтуларды дайындайды. Бұл әдісті қолдану арқылы әрбір үлгідегі микроорганизмдердің санын анықтауға болады.

Қатені тапсаңыз, мәтін бөлігін бөлектеп, басыңыз Ctrl+Enter.