Ląstelių, pasėtų ant tankios maistinės terpės, skaičiaus nustatymas (Kocho plokštelės metodas). R. Kocho darbai ir jų reikšmė mikrobiologijai ir infekcinei patologijai Grynosios aerobų kultūros išskyrimas Mikrobiologija
Pagrindiniai mikrobiologijos, virusologijos ir imunologijos raidos etapai
Tai apima:
1.empirinių žinių(iki mikroskopų išradimo ir jų panaudojimo mikropasauliui tirti).
J. Fracastoro (1546) pasiūlė gyvąją infekcinių ligų sukėlėjų prigimtį – contagium vivum.
2.Morfologinis laikotarpis truko apie du šimtus metų.
Anthony van Leeuwenhoekas 1675 m pirmą kartą aprašyti pirmuonys, 1683 metais – pagrindinės bakterijų formos. Prietaisų (maksimalus X300 mikroskopų padidinimas) ir mikropasaulio tyrimo metodų netobulumas neprisidėjo prie greito mokslo žinių apie mikroorganizmus kaupimo.
3.Fiziologinis laikotarpis(nuo 1875 m.) – L. Pastero ir R. Kocho era.
L. Pasteur - fermentacijos ir irimo procesų mikrobiologinių pagrindų tyrimas, pramoninės mikrobiologijos raida, mikroorganizmų vaidmens medžiagų apykaitos gamtoje išaiškinimas, atradimas. anaerobinis mikroorganizmai, principų raida aseptika, metodus sterilizacija, slopinimas ( slopinimas)virulentiškumas ir gavimas vakcinos (vakcinų padermės).
R. Kochas – atrankos metodas grynosios kultūros ant kietų maistinių medžiagų, bakterijų dažymo anilino dažais metodai, juodligės, choleros atradimas ( Kocho kablelis), tuberkulioze (Koch lazdos), mikroskopijos metodų tobulinimas. Henlės kriterijų, žinomų kaip Henle-Koch postulatai (triada), eksperimentinis pagrindimas.
4.imunologinis laikotarpis.
I.I. Mechnikovas yra „mikrobiologijos poetas“ pagal vaizdinį Emilio Roux apibrėžimą. Jis sukūrė naują mikrobiologijos erą – imuniteto (imuniteto) doktriną, sukūręs fagocitozės teoriją ir pagrindęs ląstelinę imuniteto teoriją.
Tuo pačiu metu buvo kaupiami duomenys apie gamybą organizme antikūnų prieš bakterijas ir jų toksinai kuri leido P. Erlichui sukurti humoralinę imuniteto teoriją. Vėlesnėje ilgalaikėje ir vaisingoje diskusijoje tarp fagocitinių ir humoralinių teorijų šalininkų buvo atskleista daug imuniteto mechanizmų ir gimė mokslas. imunologija.
Vėliau buvo nustatyta, kad paveldimas ir įgytas imunitetas priklauso nuo koordinuoto penkių pagrindinių sistemų veiklos: makrofagų, komplemento, T ir B limfocitų, interferonų, pagrindinės histokompatibilumo sistemos, teikiančios įvairias imuninio atsako formas. I.I.Mechnikovas ir P.Erlichas 1908 m. buvo apdovanotas Nobelio premija.
1892 metų vasario 12 d vykusiame Rusijos mokslų akademijos posėdyje D.I.Ivanovskis pranešė, kad tabako mozaikos ligos sukėlėjas yra filtruojantis virusas. Ši data gali būti laikoma gimtadieniu virusologija o D.I. Ivanovskis - jo įkūrėjas. Vėliau paaiškėjo, kad virusai sukelia ligas ne tik augalams, bet ir žmonėms, gyvūnams ir net bakterijoms. Tačiau tik nustačius geno prigimtį ir genetinį kodą, virusai buvo priskirti laukinei gamtai.
5. Kitas svarbus žingsnis mikrobiologijos raidoje buvo antibiotikų atradimas. 1929 metais A. Flemingas atrado peniciliną ir prasidėjo antibiotikų terapijos era, kuri paskatino revoliucinę medicinos pažangą. Vėliau paaiškėjo, kad mikrobai prisitaiko prie antibiotikų, o atsparumo vaistams mechanizmų tyrimas leido atrasti antrąjį. ekstrachromosominis (plazmidinis) genomas bakterijos.
Studijuoja plazmidė parodė, kad jie yra dar paprastesni organizmai nei virusai, ir skirtingai bakteriofagai nekenkia bakterijoms, bet suteikia joms papildomų biologinių savybių. Plazmidžių atradimas gerokai papildė idėjas apie gyvybės egzistavimo formas ir galimus jos raidos būdus.
6. Modernus molekulinė genetinė stadija mikrobiologijos, virusologijos ir imunologijos raida prasidėjo XX amžiaus antroje pusėje, siejant su genetikos ir molekulinės biologijos pasiekimais, elektroninio mikroskopo sukūrimu.
Eksperimentuose su bakterijomis buvo įrodytas DNR vaidmuo perduodant paveldimus požymius. Bakterijų, virusų, o vėliau ir plazmidžių, kaip molekulinių biologinių ir genetinių tyrimų objektų, naudojimas leido giliau suprasti esminius gyvybės procesus. Genetinės informacijos kodavimo bakterijų DNR principų išaiškinimas ir genetinio kodo universalumo nustatymas leido geriau suprasti molekulinius genetinius modelius, būdingus labiau organizuotiems organizmams.
Escherichia coli genomo iššifravimas leido sukurti ir persodinti genus. Dabar Genetinė inžinerija sukūrė naujas kryptis biotechnologijos.
Iššifruota daugelio virusų molekulinė genetinė organizacija ir jų sąveikos su ląstelėmis mechanizmai, nustatyta viruso DNR galimybė integruotis į jautrios ląstelės genomą ir pagrindiniai viruso kancerogenezės mechanizmai.
Imunologija patyrė tikrą revoliuciją, peržengusi infekcinę imunologiją ir tapusi viena iš svarbiausių pagrindinių medicinos ir biologijos disciplinų. Iki šiol imunologija yra mokslas, tiriantis ne tik apsaugą nuo infekcijų. Šiuolaikine prasme Imunologija – mokslas, tiriantis organizmo savigynos nuo visko, kas genetiškai svetima, mechanizmus, išlaikant struktūrinį ir funkcinį organizmo vientisumą.
Šiuo metu imunologija apima daugybę specializuotų sričių, tarp kurių, be infekcinės imunologijos, svarbiausios yra imunogenetika, imunomorfologija, transplantacijos imunologija, imunopatologija, imunohematologija, onkoimunologija, ontogenezės imunologija, vakcinologija ir taikomoji imunodiagnostika.
Mikrobiologija ir virusologija kaip fundamentalieji biologijos mokslai taip pat apima daugybę nepriklausomų mokslo disciplinų, turinčių savo tikslus ir uždavinius: bendrosios, techninės (pramonės), žemės ūkio, veterinarijos ir svarbiausios žmonijai. medicininė mikrobiologija ir virusologija.
Medicinos mikrobiologija ir virusologija tiria žmogaus infekcinių ligų sukėlėjus (jų morfologiją, fiziologiją, ekologiją, biologines ir genetines savybes), kuria jų auginimo ir identifikavimo metodus, specifinius diagnostikos, gydymo ir profilaktikos metodus.
Bendram bakterijų skaičiui nustatyti naudojamas Kocho metodas. Į tuščią sterilų Petri lėkštelę supilkite 1 ml tiriamosios medžiagos iš atitinkamo praskiedimo ir supilkite 10 - 15 ml išlydyto ir atšaldyto iki 45 0 C MPA, sumaišykite su skysčiu, sukdami puodelį ant stalo paviršiaus.
Išdirbus pasėlius, suskaičiuojamos kolonijos, išaugusios agaro paviršiuje ir gilumoje. Norėdami tai padaryti, puodelis dedamas aukštyn kojomis juodame fone, kiekviena suskaičiuota kolonija yra pažymėta žymekliu ant stiklo. Įvertinkite tik tuos patiekalus, kurie išaugo nuo 30 iki 300 kolonijų. Jei ant lėkštelės išaugo daugiau nei 300 kolonijų ir analizės pakartoti negalima, kolonijas galima skaičiuoti esant stipriam šoniniam apšvietimui naudojant padidinamąjį stiklą ir specialią lėkštę su tinkleliu.
Kolonijų skaičius skaičiuojamas ne mažiau kaip 20 kvadratų po 1 cm 2 skirtingose lėkštelėse. Apskaičiuojamas vidutinis kolonijų skaičius 1 cm 2, kuris padauginamas iš lėkštelės ploto.
Skaičiuojant kolonijas, galima naudoti specialų bakterijų skaičiavimo prietaisą PSB.
Skaičiuojant kolonijas kiekviename lėkštelyje, nustatomas bakterijų skaičius 1 ml (cm 3) arba 1 g tiriamosios medžiagos, atsižvelgiant į praskiedimą. Galutiniam bakterijų skaičiui imamas kolonijų skaičiavimo lėkštelėse su dviem gretimais skiedimais rezultatų aritmetinis vidurkis.
Pavyzdys: veisiasi 10 -1 - 250 kolonijų, veisiasi 10 -2 - 23 kolonijos.
Bendras bakterijų skaičius = 250 x 10 + 23 x 100 / 2 = 2400 cfu / ml = 2,4 x 10 2 cfu / ml (kolonijas formuojantys vienetai 1 ml).
Tyrimo rezultatas gali būti suapvalinamas iki 2-3 reikšminių skaičių.
Titravimo metodas.
Naudojamas PSD skaičiui nustatyti.
1 etapas: medžiagos homogenizacija. Jei reikia, suspensijos paruošimas, kad mikroorganizmai būtų perkelti į skystą fazę.
2 etapas: skiedimų serijos paruošimas.
3 etapas: pasirinktų tiriamosios medžiagos tūrių (100, 10, 1 ml) ir jos 1 ml praskiedimų pasėjimas į skystą maistinę terpę. Siekiant pagerinti metodo tikslumą, kiekvieną tūrį galima lygiagrečiai sėti į kelias maistinės terpės dalis (dviejų, trijų, penkių eilių sėja). Optimalus – tai trigubas kartojimas (pakankamas patikimumas santykinai mažomis sąnaudomis).
4 etapas: atsižvelgiant į augimą skystoje maistinėje terpėje ir sėjimą iš teigiamų tūrių kietoje maistinėje terpėje.
5 etapas: mikroorganizmų, auginamų kietoje maistinėje terpėje, identifikavimas. Tuo pačiu metu atsižvelgiama į kultūrines savybes ir, jei reikia, atliekami papildomi tyrimai (tinktorinių, morfologinių, biocheminių ir serologinių savybių tyrimas).
Jei naudojamas vienos eilės metodas, rezultatas paprastai išreiškiamas kaip tikslinio mikroorganizmo titras, kuris laikomas mažiausiu tūriu (didžiausiu praskiedimu), kuriame jis vis dar buvo rastas.
Jei buvo naudojamas kelių eilučių metodas, rezultatai registruojami naudojant specialias lenteles, kurios leidžia, remiantis teigiamų tūrių deriniu, kuris sukėlė, nustatyti titrą, indeksą (MP).
Ypatingos aplinkos.
Bakteriologijoje plačiai naudojamos pramoninės gamybos sausos maistinės terpės, kurios yra higroskopiniai milteliai, kuriuose yra visi terpės komponentai, išskyrus vandenį. Jų paruošimui naudojami pigių ne maisto produktų (žuvies atliekos, mėsos ir kaulų miltai, techninis kazeinas) triptiniai skaidiniai. Jie yra patogūs transportuoti, gali būti saugomi ilgą laiką, atleidžia laboratorijas nuo didžiulio terpės paruošimo proceso ir priartina laikmenų standartizavimo klausimą. Medicinos pramonė gamina sausą Endo, Levin, Ploskirev terpę, bismuto sulfito agarą, maistinį agarą, angliavandenius su BP indikatoriumi ir kt.
termostatai
Mikroorganizmų auginimui naudojami termostatai.
Termostatas yra prietaisas, kuris palaiko pastovią temperatūrą. Prietaisas susideda iš šildytuvo, kameros, dvigubų sienelių, tarp kurių cirkuliuoja oras arba vanduo. Temperatūra reguliuojama termostatu. Daugumos mikroorganizmų dauginimuisi optimali temperatūra yra 37°C.
7 VEIKLA
TEMA: GRYNOS AEROBIKOS KULTŪROS IŠSkyrimo METODAI. GRYNOS AEROBINIŲ BAKTERIJŲ KULTŪROS IŠSkyrimo MECHANINIO ATSIEJIMO METODAIS ETAPAI
Pamokos planas
1. Bakterijų „grynosios kultūros“ sąvoka
2. Grynųjų kultūrų išskyrimo mechaninio atskyrimo metodai
3. Biologiniai grynųjų kultūrų išskyrimo metodai
4. Bakterijų nustatymo metodai
Pamokos tikslas: Supažindinti studentus su įvairiais grynųjų kultūrų išskyrimo būdais, išmokyti pasėlius apdirbti kilpa, potėpiais, dūriais
Demonstravimo gairės
Natūralioje buveinėje bakterijos randamos asociacijose. Norint nustatyti mikrobų savybes, jų vaidmenį patologinio proceso vystymuisi, būtina, kad bakterijos būtų vienarūšių populiacijų (grynųjų kultūrų) pavidalu. Gryna kultūra – tai tos pačios rūšies bakterijų individų, auginamų maistinėje terpėje, rinkinys.
Grynųjų aerobinių bakterijų kultūrų išskyrimo metodai
Pastero metodas Kocho metodas Biologinis fizinis
(yra istorinė (plokštelės laidai)
prasmė)
Cheminis metodas
Ščukevičius
Modernus
Sėjama kilpa Sėjama mentele
(Drigalskio metodas)
Grynųjų kultūrų išskyrimo metodai:
1. Mechaninio atskyrimo metodai paremti mikrobų atskyrimu nuosekliai trinant tiriamąja medžiaga agaro paviršių.
a) Pastero metodas – turi istorinę reikšmę, numato nuoseklų tiriamosios medžiagos praskiedimą skystoje maistinėje terpėje valcavimo metodu
b) Koch metodas – lėkštelių išdėstymo metodas – pagrįstas tiriamosios medžiagos nuosekliu skiedimu mėsos-peptono agaru, po to mėgintuvėlių su praskiesta medžiaga pilimu į Petri lėkšteles.
c) Drygalskio metodas – sėjant gausiai mikroflora pasėtą medžiagą, nuosekliai sėjai mentele naudoti 2-3 puodelius.
d) Sėjimas su kilpa lygiagrečiais judesiais.
2. Biologiniai metodai yra pagrįsti patogenų biologinėmis savybėmis.
a) Biologinė – labai jautrių gyvūnų infekcija, kur mikrobai greitai dauginasi ir kaupiasi. Kai kuriais atvejais šis metodas yra vienintelis, leidžiantis išskirti patogeno kultūrą nuo sergančio žmogaus (pavyzdžiui, sergančio tuliaremija), kitais atvejais jis yra jautresnis (pavyzdžiui, baltųjų pelių pneumokoko išskyrimas). arba jūrų kiaulyčių tuberkuliozės sukėlėjas).
b) Cheminis – pagrįstas mikobakterijų atsparumu rūgštims. Norėdami išlaisvinti medžiagą nuo lydinčios floros, ji
apdorotas rūgšties tirpalu. Augs tik tuberkuliozės bacilos, nes rūgštims atsparius mikrobus rūgštis naikina.
c) Fizinis metodas pagrįstas sporų atsparumu karščiui. Išskirti sporas formuojančių bakterijų kultūras iš
mišinius, medžiaga kaitinama iki 80°C ir pasėjama ant maistinės terpės. Augs tik sporinės bakterijos, nes jų sporos liko gyvos ir davė augimo.
d) Šukevičiaus metodas – pagrįstas dideliu vulgaraus proteuso, galinčio šliaužiančiu augimu, mobilumu.
Agaro plokštelės paruošimo būdas
MPA ištirpsta vandens vonioje, po to atšaldoma iki 50-55°C. Buteliuko kaklelis sudeginamas alkoholio lempos liepsnoje, Petri lėkštelės atidaromos taip, kad buteliukų kaklelis patektų, neliečiant lėkštelės kraštų, išpilkite 10-15 ml MPA, uždarykite dangtį, indą pakratykite, kad terpė tolygiai pasiskirstytų, palikite ant horizontalaus paviršiaus, kol sustings. Po džiovinimo lėkštelės su plokšteliniu agaru laikomos šaltai.
Kilpinė sėja
Steriliai aušinama kilpa paimamas medžiagos lašas, kaire ranka šiek tiek atidaromas vienas puodelio kraštas, į vidų įkišama kilpa ir vienoje vietoje daromi keli brūkštelėjimai priešingame krašte, tada kilpa nuplėšiama. ir medžiaga skiepijama lygiagrečiais potėpiais nuo vieno puodelio krašto iki kito 5-6 mm intervalu. Sėjos pradžioje, kai ant kilpos bus daug mikrobų, jie duos susiliejantį augimą, tačiau su kiekvienu mikrobų paspaudimu ant kilpos mikrobų bus vis mažiau ir jie liks pavieniai ir duos. izoliuotos kolonijos.
Sėjama pagal Drygalskio metodą
Šis metodas naudojamas sėjant gausiai mikroflora (pūliais, išmatomis, skrepliais) pasėtą medžiagą. Sėjai pagal Drygalsky metodą imama mentele ir keli puodeliai (3-4). Mentelė yra įrankis, pagamintas iš metalinės vielos arba stiklo strėlės, sulenktas trikampio arba L formos. Medžiaga kilpa arba pipete įvedama į pirmąjį puodelį ir mentele tolygiai paskirstoma po terpės paviršių, ta pačia mentele, jos nesudeginant, medžiaga įtrinama į maistinę terpę antrajame puodelyje, o po to trečiajame. Su šia inokuliacija pirmoji plokštelė susilieja, o izoliuotos kolonijos augs kitose lėkštelėse.
Yra žinoma palyginti nedaug metodų, kaip išskirti bakterijas kaip grynas kultūras. Dažniausiai tai daroma išskiriant pavienes ląsteles ant kietos auginimo terpės, naudojant inokuliavimo juostelėmis metodą arba į lėkštes supilant nedidelį kiekį skystos kultūros ( praskiedimo metodas). Tačiau atskiros kolonijos gavimas ne visada garantuoja kultūros grynumą, nes kolonijos gali augti ne tik iš atskirų ląstelių, bet ir iš jų grupių. Jei mikroorganizmai formuoja gleives, tada prie jų dažnai prisitvirtina svetimos formos. Valymui geriau naudoti neselektyviąją terpę (MPA), nes ant jos geriau auga teršalai ir juos lengviau aptikti.
Išskirtos kolonijos ant kietos maistinės terpės gaunamos sijojant mikroorganizmų suspensiją mentele ( Kocho metodas), arba naudojant bakteriologinę kilpą ( sekinančio insulto metodas). Dėl mechaninio mikrobų ląstelių atskyrimo iš kiekvienos iš jų gali susidaryti izoliuota vienos mikrobų rūšies kolonija.
Sijojimas mentele (Koch metodas) gaminamas tokia seka:
1) lašas sodrinimo kultūros sterilia pipete užlašinamas ant maistinės terpės paviršiaus puodelyje Nr. 1 ir paskirstomas sterilia mentele;
2) mentele išimama, puodelis greitai uždaromas ir mentelė perkeliama į puodelį Nr.2 jo nesterilizuojant. Imituokite kultūros pasiskirstymą visame terpės paviršiuje, paliesdami jos paviršių ta pačia mentelės puse, kuri anksčiau buvo naudojama mėginiui paskirstyti;
3) lygiai tokie patys veiksmai atliekami puodelyje Nr. 3, po to mentele sterilizuojama;
4) puodeliai su sėklomis dedami į termostatą ir inkubuojami optimalioje temperatūroje.
Po tam tikro laiko puodeliai nuimami nuo termostato ir tiriamas mikroorganizmų augimas. Paprastai lėkštelėje Nr. 1 stebimas nuolatinis bakterijų augimas, o tolesniuose induose pastebimos kolonijos.
Kilpinis sijojimas (išeikvojamo smūgio metodas) apima bakteriologinės kilpos inokuliavimą iš sodrinimo kultūros ant agaro terpės paviršiaus Petri lėkštelėse. Pirmajame etape ant agaro terpės uždedama kilpa su kultūra, lygiagrečiai judant (4.2 pav., A). Kilpa sterilizuojama, atšaldoma ant nesokuliuotos agaro terpės dalies ir brėžiama eilė brūkšnių pirmajai statmena kryptimi (4.2 pav., B). Tada kilpa vėl sterilizuojama, atšaldoma ir braukiama kryptimi IN(4.2 pav.), o po kitos sterilizacijos – kryptimi G(4.2 pav.). Puodeliai dedami į termostatą ir po tam tikro laiko atsižvelgiama į rezultatus. Paprastai dėl smūgių A Ir B daug kolonijų auga (kartais nuolatinis augimas), o ant smūgių IN Ir G susidaro izoliuotos kolonijos.
4.2 pav. Bakterijų sijojimo schema, siekiant gauti izoliuotas kolonijas
Serijiniai skiedimai kietoje terpėje- paprasčiausias lėkštelės inokuliacijos būdas, kurį sudaro tai, kad mėginį pasėjus į mėgintuvėlį su steriliu išlydytu ir atvėsintu agaru, terpė sumaišoma, supilama į Petri lėkštelę ir leidžiama sustingti. Norint gauti gerai izoliuotas kolonijas, paruošiama eilė dešimteriopių skiedimų ir iš karto į lėkštelę įpilama 1 ml mėginių, įpilama 15–20 ml išlydyto agaro terpės ir maišoma purtant indą. Kartais atskiros kolonijos panardinamos į agarą ir jas galima pašalinti tik mechaniškai. Blogai ir tai, kad bakterijos kurį laiką būna išlydyto agaro temperatūros terpėje.
Jei, remiantis tam tikrais augalų simptomais ir mikroskopinio tyrimo rezultatais, įtariama, kad ligos sukėlėjas yra bakterija, kitą žingsnį reikėtų ją išskirti.
Šiuo atveju daroma prielaida, kad patogenas yra užterštas susijusiais organizmais, ty yra mišri populiacija. Kad patogenas būtų gautas kaip atskira auganti kolonija, audinio maceratas turi būti išteptas ant terpės.
Insultinė sėja. Kalcinuota inokuliavimo kilpa paimamas nedidelis kiekis augalinio audinio macerato, kuriame yra bakterijų, ir lengvais judesiais, nepažeidžiant agaro paviršiaus, 4-6 brūkštelėjimais užtepama ant paruoštos maistinės terpės. Pakartotinai uždegus kilpą, puodelis su terpe pasukamas 90° į dešinę ir po to dar 4-6 brūkštelėjimai nuo antrojo, adata vėl uždegama ir atliekama trečioji skiepijimas. Taip pasiekiamas toks pradinės medžiagos praskiedimas, kuriame bakterijos po 48-72 valandų inkubacijos termostate 28 °C temperatūroje sudaro atskiras įvairių formų ir spalvų kolonijas. Tada kolonijos perkeliamos tolesniam tyrimui į pasvirusius agaro mėgintuvėlius. Kolonija paimama su kalcinuota kilpa ir atsargiai judant gyvatės ar zigzago pavidalu uždedama ant maistinio agaro.
Kocho liejimo metodas. Kocho liejimo metodas užtikrina, kad kiekviena kolonija susidarytų iš vienos bakterijos ląstelės. Geriausia pradinę medžiagą suspenduoti steriliame vandenyje ir taikyti Koch metodą tik šiuo skiedimu. Nedidelis suspensijos kiekis perpilamas į pirmąjį mėgintuvėlį su maistine terpe, atšaldyta iki 60 °C. Tada mėgintuvėlio turinys sumaišomas su inokuliu, sukant jį tarp delnų. Tada paimkite antrą mėgintuvėlį, atsargiai atidarykite jį virš degiklio liepsnos ir perkelkite į jį tris substrato dalis iš pirmojo mėgintuvėlio su didelėmis kilpomis. Mėgintuvėlio turinys, iššaunus kaklelį ir kamštį, supilamas į pirmąją Petri lėkštelę, šiek tiek atidarant puodelio dangtelį tiek, kad po juo būtų įkištas mėgintuvėlio kaklelis. Iš karto po išpylimo puodelis uždaromas, o maistinė terpė atsargiais judesiais paskirstoma tolygiai.
Kruopščiai sumaišę antrojo mėgintuvėlio turinį, paimkite trečiąjį mėgintuvėlį ir perkelkite į jį šešias substrato dalis kilpa iš antrojo. Mėgintuvėlio turinys supilamas į puodelį, o mėgintuvėlio turinys, sumaišius, supilamas į puodelį. Puodeliai su terpe inkubuojami termostate 28°C temperatūroje, po kelių dienų pradinėje medžiagoje esančios bakterijos suformuoja kolonijas.
Serijinis veisimas. Jei, pavyzdžiui, reikia išskirti bakterijas iš dirvožemio, tada naudojamas serijinis skiedimas. Sterili maistinė terpė (15 ml vienam indui) supilama į lėkštes, 0,1 ml paskutinių trijų suspensijos skiedimų užpilama ant sukietėjusio agaro ir stikline mentele paskirstoma ant paviršiaus.
Bakterijoms išskirti 1 g dirvožemio suspenduojama 9 ml vandens, gerai suplakama, paliekama kelias sekundes nusistovėti ir iš suspensijos ruošiami serijiniai skiedimai. Šiuo metodu galima nustatyti mikroorganizmų skaičių kiekviename mėginyje.
Jei radote klaidą, pažymėkite teksto dalį ir spustelėkite Ctrl + Enter.
