Kokande lösningar av enzymer leder till deras inaktiveringsbiokemi. Regenerering av inaktiverade enzymer. Specificitet för enzymverkan

Mängden enzym som finns närvarande i vävnader vid en given tidpunkt bestäms av de relativa hastigheterna för dess syntes och nedbrytning, såväl som koncentrationerna olika sorter inhibitorer och aktivatorer. Som regel är nedbrytningen av enzymer och en minskning av deras mängd i mediet långsamma. Enzymer kan hämmas och aktiveras ganska snabbt - inom några sekunder.

Det finns många metoder för att bestämma och uttrycka aktiviteten hos enskilda enzymer. Detta beror på variationen av enzymer, närvaron och användningen av olika substrat för att bestämma deras aktivitet.

International Biochemical Union föreslog följande definition av en enzymenhet: " Enheten för ett enzym är mängden som katalyserar omvandlingen av en mikromol av substratet per minut under specificerade standardförhållanden ». Antalet mikromol och kommer att vara lika med antalet standardenheter ... Den internationella kommissionen föreslog, om möjligt, att utföra bestämning av enzymaktiviteten vid 30 ° C och vid de pH-värden och substratkoncentration som är optimala för den enzymatiska aktiviteten.

Allmän enzymegenskaper Följ från deras proteinnatur ... Enzymer termolabila beror deras aktivitet på miljöns pH och luftfuktighet där de verkar, såväl som från påverkan av aktivatorer och inhibitorer .

När temperaturen stiger till vissa gränser ökar enzymernas aktivitet... När den optimala temperaturen för enzymet uppnås är dess katalytiska aktivitet högst. Den optimala temperaturen för många enzymer är oftast vid inom intervallet från 40 till 50 ° С (optimalt för växtenzymer - 50 - 60 ° С, och för enzymer av animaliskt ursprung - 40 - 50 ° С). Den optimala temperaturen är dock inte strikt konstant och beror på många skäl, och i synnerhet på uppvärmningens varaktighet. Ju längre verkan av enzymet, desto lägre är den optimala temperaturen. .

I temperaturintervallet från 0 till 50 ° C, med en ökning eller minskning av temperaturen för varje 10 ° C, ökar enzymaktiviteten eller minskar följaktligen 1,4 - 2 gånger. Med ytterligare uppvärmning minskar enzymernas aktivitet, och vid 80 - 100 ° C förlorar enzymer vanligtvis helt sina katalytiska egenskaper på grund av proteindenaturering .

Temperaturen för inaktivering (förlust av aktivitet) är inte densamma för olika enzymer.... Så inaktiveringen av enzymet amylas i lösning sker vid 70 ° C, sukras - vid 59, trypsin och pepsin - vid 65 ° C. När de är torra kan enzymer tolerera uppvärmning till högre temperaturer. Men vid mycket höga temperaturer sker enzyminaktivering omedelbart. Enzymer förstörs under pastörisering, sterilisering, blanchering och kokning. .

Efter värmeinaktivering återställer vissa enzymer sin katalytiska aktivitet. Ett exempel är peroxidas, som, även vid upphettning i 60 s till 150 ° C, inte helt förlorar sina katalytiska egenskaper. Därför anses peroxidas vara det mest termiskt stabila enzymet.

Vid temperaturer under 0 ° C minskar den katalytiska aktiviteten hos enzymer kraftigt, men kvarstår fortfarande även när maten är fryst.

Mediets reaktion har en signifikant effekt på enzymers katalytiska aktivitet. Enzymer förändrar sin löslighet, osmotiska tryck, viskositet och andra egenskaper under påverkan av mediets pH. Man tror att en förändring i enzymaktivitet beroende på mediets pH är associerad med en förändring jonisering enzym, substrat eller enzym-substratkomplex .

Enzymer visar optimal aktivitet endast i vissa, inneboende pH-intervall... Så pepsin, som släpps ut i den mycket sura miljön i magen, har en optimal aktivitet vid pH 1,5 och 2,5. Samtidigt har proteaser, som utsöndras av bukspottkörteln i tolvfingertarmen, optimal aktivitet i den alkaliska pH-zonen, och den optimala verkan av trypsin ligger i området pH 8-9. Vid ett pH-värde över eller under det optimala minskar enzymaktiviteten .

De flesta enzymer är mest aktiva i neutrala, lätt alkaliska eller lätt sura miljöer. När pH-värdet skiftar från optimal till en sur eller alkalisk miljö, minskar enzymaktiviteten.

Aktivatorer och inhibitorer(förlamande) enzymer kan öka respektive försvaga och till och med stoppa sin aktivitet. Aktivatorer enzymer är metalljoner: Na+, K+, Rb+, Mg 2+, Ca 2+, Cu 2+, Fe 2+ och föreningar som innehåller sulfhydrylgrupper: SH, HCN, H 2 S ... Närvaron av dessa metaller eller föreningar i en lösning vid en viss koncentration främjar den fulla aktiviteten hos vissa enzymer.

Alla enzymer är mottagliga för hämning som ett resultat av denaturering eller nedbrytning av enzymproteinet.

Kärnan i verkan av inhibitorer är i de flesta fall att de binder till aktiva grupper eller aktiva centra av enzymmolekylen. Skilja på hämmare av allmän och specifik karaktär ... TILL vanliga hämmare som undertrycka verkan av alla enzymer , inkludera tungmetallsalter (bly, silver, kvicksilver), triklorättiksyra och tannin ... Ofta är hämningen eller upphörandet av verkan av enzymer under påverkan av tungmetaller reversibel, och om ämnen som bildar föreningar med dessa metaller läggs till mediet, återställs enzymernas aktivitet.

Specifika inhibitorer verkar bara på vissa enzymer. Så cyanvätesyra verkar bara på oxidativa enzymer som innehåller järn eller koppar i det aktiva centret. Blåvätesyra kombineras med metaller, och enzymet förlorar sin aktivitet.

I en levande cell utförs regleringen av verkan av enzymer inte bara med hjälp av specifika aktivatorer och inhibitorer, utan också genom att binda enzymer på olika kolloidala strukturer av protoplasman. Denna bindning av enzymer leder till deras aktivitetsförlust. Frisättningen av enzymet från föreningen återställer dess katalytiska aktivitet.

Enzymer inaktiveras vid mycket höga tryck ... Men efter att trycket släppts återställer enzymerna sin katalytiska aktivitet.

Effekten av enzymer bromsas kraftigt i torrfoder, men slutar inte helt.... Resultaten av enzymaktivitet kan manifestera sig i en förändring i produktens kvalitet - dess mörkning, försämring av arom, smak, konsistens etc.

Hastigheten för de flesta enzymatiska reaktioner är proportionell mot koncentrationen av enzymet, åtminstone i de tidigaste stadierna. Utanför de inledande stadierna minskar hastigheten för enzymatiska reaktioner.

Enzymet bildar ett komplex med substratet, som dissocierar till ett fritt enzym och den slutliga reaktionsprodukten:

där E är ett enzym; S - substrat; ES - enzym-substratkomplex; P är slutprodukten.

Mängden substrat är mycket stor jämfört med mängden enzym, och därför påverkar koncentrationen av substratet kraftigt hastigheten för enzymatiska reaktioner. Om substratet finns i ett betydande överskott, är mängden av den resulterande produkten proportionell mot tiden. När koncentrationen av substratet minskar, minskar mängden slutprodukt (P) som bildas per tidsenhet.

Närvaron av ett enzym i en lösning bedöms av dess verkan. Så, närvaron av amylas i saliv kan bedömas av salivens förmåga att försockra stärkelse, närvaron av magpepsin - genom dess förmåga att lösa upp äggvita eller fibrin med tillräcklig hastighet.

Genom att reglera aktiviteten hos enzymer genom att skapa en lämplig reaktion i omgivningen är det möjligt att kontrollera hastigheten för reaktionerna som katalyseras av dem, liksom aktiviteten hos enzymer som finns i livsmedel, vilket gör det möjligt att utföra åtgärder för lagring av spannmål, potatis, frukt och grönsaker, produktion av ett antal produkter (vin, te, etc. .).

Enzymnomenklatur och klassificering

Under den inledande perioden av utvecklingen av teorin om enzymer fick de namn utan ett bestämt system, enligt slumpmässiga tecken, enligt namnet på substratet eller typen av katalyserad reaktion. Så, enzymet pepsin fick sitt namn från det grekiska ordet "pepsis" - jag smälter, papain - från saften från papayaväxten, rik på enzym. Det hände att enskilda författare gav olika namn åt samma enzym.

I samband med den snabba utvecklingen av vetenskapen om enzymer - fermentologi 1961 utvecklade den permanenta kommittén för enzymer vid International Biochemical Union en modern nomenklatur och klassificering av enzymer. I enlighet med denna klassificering bestod enzymets namn av kemiskt namn substrat och namnet på reaktionen som utfördes av enzymet. Till det latinska namnet på roten till substratet som enzymet verkar på (sackaros - sackaros), eller till namnet på processen som katalyseras av detta enzym (hydrolys - hydrolaser), slutet lades till"Aza"... Tillsammans med de nya namnen på många enzymer har gamla som kommit in i den vetenskapliga litteraturen (pepsin, trypsin, papain etc.) bevarats.

Enligt modern klassificering är alla enzymer indelade i sex klasser: oxidoreduktas; transferas; hydrolaser; lyaser; isomeras; ligaser (syntetaser) ... Klassificeringen av enzymer baseras på arten av deras verkan.

Varje klass är uppdelad i underklasser och varje underklass i grupper.

Oxidoreduktas

Dessa är enzymer som katalyserar redoxreaktioner som förekommer i levande organismer. Oxidationsreaktioner av ämnen i organismer åtföljs alltid av reduktionsreaktioner. Oxidoreduktaser delas in i 14 underklasser (den mest omfattande klassen av enzymer).

Oxidation fortsätter som processen att ta bort väte (elektroner) från substratet och reduktion som tillsats av väteatomer (elektroner) till acceptorn. Denna reaktion kan schematiskt representeras enligt följande:

AH 2 + B = A + BH 2,

där AH 2 är ett ämne som ger upp sitt väte och kallas donator; B är ett ämne som tar bort väte och kallas en acceptor.

En mängd olika ämnen kan oxideras - kolhydrater, fetter, proteiner, aminosyror, vitaminer, etc.

Oxidoreduktasernas roll i levande vävnader spelas av stora grupper dehydrogenas och oxidas , som namnges beroende på vilket substrat de oxiderar. Så enzymet som dehydrerar äppelsyra kallas malatdehydrogenas, den dehydrerande etylalkoholen kallas alkoholdehydrogenas, etc.

I klassen oxidoreduktaser är dehydrogenaser, som utför dehydreringsreaktionen, av primär betydelse. Alla dehydrogenaser är uppdelade i två grupper : anaerob och aerob, som kallas oxidaser .

Anaeroba dehydrogenaserär specifika enzymer som katalyserar väteuttag från vissa kemiska substanser och överföra det till andra enzymer - vätebärare. Dessa dehydrogenaser är tvåkomponentsenzymer där koenzymet lätt kan separeras från proteindelen. Som ett koenzym sammansättningen av anaeroba dehydrogenaser kan innefatta två ämnen - nikotin-amid-adenin-nukleotid ( OVAN ) eller nikotinamid-adelinin-nukleotid-fosfat ( NADP ). Båda dessa ämnen har en extremt hög reaktiv oxidations-reduktionskapacitet.

Många anaeroba dehydrogenaser är kända för att katalysera oxidationen av olika organiska föreningar. Sålunda katalyserar laktatdehydrogenas oxidationen av mjölksyra till pyrodruvsyra, isocitratdehydrogenas katalyserar oxidationen av isocitronsyra till oxalbärnstenssyra.

Till gruppen aeroba dehydrogenaser (oxidaser) inkluderar enzymer, som inkluderar som ett koenzym går in vitamin B 2 , (riboflavin ), därför kallas sådana enzymer flavin ... Flavinenzymer kan ta bort väte från det oxiderade ämnet och överföra det till andra föreningar eller syre i luften:

2H2O2 → 2H2O + O2.

Genom att ta bort väte från ämnet som oxideras och överföra det till luftens syre kan oxidas alltså bilda vatten eller väteperoxid (H 2 O eller H 2 O 2). Denna grupp av enzymer inkluderar polyfenoloxidas, askorbinatoxidas, glukoxidas.

Polyfenoloxidasär ett aerobt dehydrogenas för vilket acceptorn för väte är gasformigt syre .

Det verkar på o-difenoler, polyfenoler, tanniner och tyrosin. Polyfenoloxidas är utbrett i svampar och högre växter, särskilt i gröna teblad. Verkan av polyfenoloxidas förklarar mörkningen på snittet av fruktköttet av frukt och grönsaker, potatis, samt mörkningen av det färska tebladet när det rullas. Polyfenoloxidas spelar en viktig roll som mellanprodukt i växtrespiration.

Enzym peroxidas tillsammans med polyfenoloxidas och cytokromoxidas deltar den aktivt i processerna för växtrespiration och växtförsvarsreaktioner mot fytopatogena växtmikroorganismer.

Den aktiva gruppen av peroxidas innehåller järn ... Använder enzymet peroxidas på grund av väteperoxid och vissa andra organiska peroxider sker oxidation av organiska föreningar. Peroxidas bildar en komplex organisk förening, som ett resultat av vilken peroxid aktiveras och förvärvar förmågan att fungera som en väteacceptor:

Många organiska föreningar reagerar med syre i luften och bildar peroxider. Peroxider bildas särskilt lätt vid oxidation av föreningar med omättade bindningar med atmosfäriskt syre: karotenoider, omättade fettsyror och vissa kolväten.

Enzym katalas katalyserar processen att dela väteperoxid i vatten och syre:

Katalasmolekylen, liksom peroxidas, innehåller järn ... Huvudsyftet med katalas i kroppen är att det förstör väteperoxiden som är skadlig för cellerna, som bildas vid andning.

Enzym lipoxygenas katalyserar bildningen av peroxider och hydroperoxider under oxidativ förstöring av fetter.

Lärare:
Ph.D.
Kuznetsova Ekaterina Igorevna

Enzyminaktiveringsmekanismer
1. Ändra den primära strukturen:
1.1. Avbrott i polypeptidkedjan:
Hårda förhållanden (långvarig kokning i HCl) -
hydrolys till individuell am-t.
Vid upphettning till 100 ° C (pH 7-8), hydrolys
peptidbindningar är obetydliga.
Mest känslig för
högtemperaturhydrolys är
peptidbindningar som bildas av rester
asparaginsyra.
Proteaser (bakteriell kontaminering, autolys).

Lösning:


inaktiverade enzymer.

1.2 Oxidation av funktionella grupper av enzymet
SH-grupper av cystein- och indolfragment
tryptofan, vid förhöjda temperaturer, kan
oxidera (cysteinsulfoxiföreningar
(SOH, SO2H) och produkter
öppning av indolringen av tryptofan.

Lösning:
Återaktivera med återställande
medel, i synnerhet tioler med låg molekylvikt
(till exempel cystein eller ditiotreitol).

Orsak: Tioler och andra rekonstituerade
svavelföreningar, till exempel Na2SO3, Na2S2O3.
Disulfidbindningsreducerande produkt
(S-S) är:
1) tiolform (protein-SH)
2) blandad disulfid av tiolformen av proteinet med
ett reduktionsmedel, till exempel
protein – S – SO3).

1.3. Klyvning av disulfidbindningar
Alkalisk hydrolys av cystein → dehydroalanin →
På grund av dess nukleofila egenskaper
interagerar med NH2-grupper av lysin och SHcystein → lysinoalanin och lantionin.
För fullständig förstörelse av alla S – S-bindningar krävs ganska svåra förhållanden (0,1–1 M alkali,
100°C).
Men förstörelsen av de mest reaktiva
S – S-bindningar kan ske i ganska mjuka
förhållanden - till exempel vid temperaturer på 60-80 ° C och
svagt alkaliska pH-värden.
Att tänka på vid användning av enzymer i
som tillsatser till tvättmedel.

Lösning:
Att lägga tioler till mediet kommer att resultera i
klyvning av den blandade disulfiden och
efterföljande bildande av den korrekta S-S-bindningen

1.4. Kemisk modifiering av katalytiska SH-grupper.
Tungmetallkatjoner (Hg, Pb och Cu)
binder till SH-grupper på det aktiva stället
enzym
↓
Bildning av motsvarande merkaptider
↓
Enzymet är inaktiverat

10.

1.5. Fosforylering av proteiner in vivo.
Genom verkan av fosforylas och fosfatas,
ingår i semi-renat enzym
preparat i form av föroreningar
↓
Fosforsyra binder till OH-grupper
serin och treonin.
↓
Konformationsförändringar i protein
molekyl
↓
enzyminaktivering.

11.

Lösning:
Det finns praktiskt taget inga exempel i litteraturen.
framgångsrik återaktivering på detta sätt
inaktiverade enzymer.

12.

1.6. Deaminering av asparaginrester.
Vid temperaturer (cirka 100 ° C) och pH (ca
4,0-5,0) deaminering av rester sker
asparagin.
↓
enzyminaktivering.

13.

Lösning:
Det finns praktiskt taget inga exempel i litteraturen.
framgångsrik återaktivering på detta sätt
inaktiverade enzymer.

14.

1.7. Strålningsinaktivering av enzymer
γ-bestrålning och UV-ljus
Påverka funktionella grupper
enzymer, peptidbindningar och SH-grupper
cysteinrester.

15.

2. Aggregation
Observerad vid förhöjda temperaturer, kl
extrema pH-värden, i närvaro av
vissa kemiska föreningar.
Ju högre koncentration, desto snabbare går det
aggregering.
Hydrofoba interaktioner och väte
bindningar, bildandet av disulfid
broar mellan individuellt protein
molekyler

16.

Lösning:
Det är nödvändigt att förstöra intermolekylär
kovalenta och icke-kovalenta kontakter c
med koncentrerade lösningar
urea och guanidinklorid, extrem
pH-värden.
Om, under aggregationen av enzymer,
intermolekylära S-S -bryggor införs i mediet i
relativt låga koncentrationer
(μmol/L) tiolinnehållande reagens (t.ex.
cystein eller ditiotreitol).
Vid sådana koncentrationer, intramolekylärt
S-S-bindningar i ett protein påverkas som regel inte.

17.

3. Inaktivering av enzymer genom yta
spänning
Ytspänning vid gränssnittet
mellan luft och rent vatten är 80
dyn / cm.
Skumbildning orsakar denaturering
enzymer adsorberade vid gränsytan
faser.

18.

Lösning:
Tillsatsen av ett ytaktivt medel minskar ytan
spänning upp till 1 dyn/cm.

19.

4. Sorption av protein på reaktionens väggar
fartyg
Sorption på grund av icke-kovalenta interaktioner
leder till en minskning av koncentrationen av enzymet i
lösning.
Måste beaktas när man arbetar med
utspädda proteinlösningar
(koncentration 10-8-10-10 mol/l).
Under påverkan av denaturerande faktorer
proteiners förmåga att sorberas på väggarna
reaktionskärlet kan öka.

20.

Lösning:
Desorption av enzymet från reaktionens väggar
fartyget uppnås genom att förstöra
ospecifika interaktioner mellan
protein och sorptionsställen på ytan
fartyg.
Extrema pH-värden kan användas,
koncentrerade lösningar av urea eller
guanidinklorid.

21.

5. Dissociation av oligomera proteiner till
subenheter
Orsak: Urea, tvättmedel, syror el
uppvärmningen.
Leda till:
individens konformationsförändringar
underenheter;
aggregering av underenheter;
dissociation av kofaktorer från aktiva centra;
modifiering av funktionella grupper, som i
oligomert protein skyddades från
kontakt med lösningsmedel.

22.

6. Desorption av kofaktorn från det aktiva stället
enzym
Orsaker: uppvärmning, kelatbildning, dialys
Om dissociationen av kofaktorn åtföljs av
betydande konformationsförskjutningar eller
kemisk modifiering av viktiga
funktionella grupper → enzym
inaktiveras irreversibelt.
Om det samtidigt inte fanns någon betydande
förändringar i proteinkonformation och sedan lägga till
på onsdag leder ett överskott av kofaktor till
enzymreaktivering.

23.

Regenerering av kofaktorer
Regenereringsmetoder:
Enzymatisk (metoder som använder konjugerade substrat eller enzymer)
Icke-enzymatisk (kemisk och
elektrokemiska metoder)

24.

Enzymatisk metod

För stora mängder införs i systemet
konjugerat substrat av samma enzym:
Exempel: när alkoholdehydrogenas fungerar
NADH konsumeras.

25.

Enzymatisk metod
1. Användning av konjugerade substrat.
Nackdel:
höga koncentrationer används
konjugerat substrat, eftersom jämvikten
reaktionerna är starkt sidledes
bildandet av alkohol;
komplicerar förfarandet för tilldelning av huvuddelen
produkt från reaktionsblandningen.

26.

Enzymatisk metod
2. Använder parad
enzymatiska reaktioner
Enzym 2 introduceras dessutom i systemet,
vars funktion ger
regenerering av koenzymet.
De enzymer som används i systemet måste ha
olika substratspecificitet

27.

Icke-enzymatiska metoder
1. Kemiska metoder.
Natriumditionit och lite
pyridiniumsalter:
+ Låg kostnad.
- kan hämma vissa enzymer.
Flavin-koenzymer

28.

Icke-enzymatiska metoder
2. Elektrokemiska metoder.
Direkt elektrokemisk reduktion eller
oxidation.
"-" visas under regenerering
enzymatiskt inaktiva former av koenzym,
till exempel som ett resultat av dess dimerisering.

29. STABILISERING AV ENZYMER I BIOTEKNOLOGISKA SYSTEM

30.

Problem som uppstår vid användning
enzymer i biotekniska processer:
1. Förhöjda temperaturer
2. Extrema pH-värden
3. Höga halter av ekologiskt
lösningsmedel eller ytaktiva ämnen.
4. Oförmåga att återanvända
enzym.
5. Svårighet att skilja enzymet från
produkt.

31.

Grundläggande tillvägagångssätt för stabilisering
enzymer:
1. Tillsätt stabiliserande ämnen till mediet,
där enzymet lagras eller utförs
enzymatisk reaktion.
2. Kemisk modifiering av enzymet.
3. Immobilisering av enzymet.

32.

1. Substrat eller deras analoger:
Enzym-substratkomplexet är ofta mer
resistent än fritt enzym.
Exempel: Laktatdehydrogenas i närvaro av
laktat är mer värmebeständigt.

33.

Enzymstabilisering med:
2. Organiska lösningsmedel:
Flervärda alkoholer stabiliserar en del
enzymer genom att öka motståndet
intramolekylära vätebindningar i ett protein.
Exempel: Kymotrypsin i närvaro av 50-90%
glycerol är mer resistent mot proteolys

34.

Enzymstabilisering med:
3. Salt:
Vid låga saltkoncentrationer (<0,1M) катионы
Ca2+, Zn2+, Mn2+, Fe2+, etc. kan specifikt
interagerar med metalloproteiner.
Några av dem är kofaktorer.
Ca2+ kan stabilisera tertiärt
strukturen av ett antal proteiner på grund av bildningen
jonbindningar med två olika
aminosyrarester.
Exempel: i α-amylas (från bacillus caldolyticus)
Ca2+ ökar värmen avsevärt
stabilitet.

35.

36.

Enzymkemisk modifiering
1. Enzymet tar en mer stabil
gestaltning.
2. Införande av nya funktionella grupper i protein
leder till bildandet av ytterligare
stabiliserande vätebindningar eller salt
broar.
3. Vid användning av opolära anslutningar
ökade hydrofoba interaktioner.
4. Modifiering av hydrofoba ytareor
protein av hydrofila föreningar minskar
området för ogynnsam kontakt med externa
opolära rester med vatten.
Exempel: glutaraldehyd

37.

Enzymmobilisering tillåter:
Öka stabiliteten hos enzymet (uppvärmning,
autolys, verkan av aggressiva medier, etc.)
1. Återanvänd enzymet
2. Separera enzymet från reagenser och produkter
reaktioner.
3. Avbryt reaktionen vid rätt tidpunkt.

38.

Immobiliserade enzymer är läkemedel
enzymer vars molekyler är associerade med
transportör, samtidigt som den bibehålls helt eller
delvis dess katalytiska egenskaper.
Immobiliseringsmetoder:
1. Kemisk
2. Fysiskt

39.

Immobiliseringsmetoder:
Följande kan användas som bärare:
1) Organiska material:
1.1) naturliga (polysackarider, proteiner, lipider)
1.2) syntetiska polymerbärare
2) Oorganiska material (matriser på
baserad på silikagel, lera, keramik, naturlig
mineraler etc.)

40.

1) adsorption av enzymet på en olöslig bärare
som ett resultat av elektrostatisk, hydrofob,
Wander-Waals och andra interaktioner;

;

strukturer;
4) Ingående i ett tvåfassystem.

41.

Fysiska immobiliseringsmetoder:

Uppnås genom att kontakta en vattenlösning
enzym med en bärare.

42.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
1) adsorption av enzymet på en olöslig bärare
Faktorer som påverkar adsorption:
1. Specifik yta och porositet hos bäraren
2. pH-värdet (på icke-jonbytare, adsorptionen
vid proteinets isoelektriska punkt)
3. Lösningens jonstyrka (ökning av jonstyrkan -
desorption av enzymet, men ibland den motsatta situationen
"Salta ut")
4. Koncentration av enzymet.
5. Temperatur (å ena sidan denaturering, s
ytterligare en accelererad diffusion)

43.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
1) adsorption av enzymet på en olöslig bärare
Fördelar:

2) Mediatillgänglighet
Nackdelar:
1) Otillräcklig bindningsstyrka
2) Många bärare är biologiskt nedbrytbara

44.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
2) införandet av enzymet i det semipermeabla
kapsel, till ett semipermeabelt membran

45.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
2) införandet av enzymet i det semipermeabla
kapsel, till ett semipermeabelt membran
Fördelar:
1) Relativ enkelhet i tekniken
2) Skydd mot mikroorganismer
3) Det finns inga spridningsrestriktioner (sedan
förhållandet mellan yta och yta är stort och
membrantjockleken är liten)
Nackdelar:
1) Biologiskt nedbrytbart
2) Ej tillämpligt för hög molekylvikt

46.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
3) mekanisk inkludering av enzymet i gelén
strukturer
Enzymet är inkorporerat i ett tredimensionellt rutnät
polymerkedjor som bildar en gel.

47.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
3) mekanisk inkludering av enzymet i gelén
strukturer
Bör övervägas:
1. Överensstämmelse mellan porstorleken och enzymets storlek.
2. Matrisens natur (eftersom den skapar
mikromiljö för enzymet, kan
skapa ett annat pH än lösningens pH och
öka affiniteten hos substratet för matrisen, vilket
ökar hastigheten för enzymatisk reaktion)

48.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
3) mekanisk inkludering av enzymet i gelén
strukturer
Fördelar:
1) Relativ enkelhet i tekniken
2) Ökad mekanisk, kemisk och
matrisernas termiska motstånd.
3) Enzymet stabiliseras
4) Enzymet är skyddat från bakterier
skada
Nackdelar:
1) Ej tillämpligt för hög molekylvikt

49.

Fysiska immobiliseringsmetoder:
4) Anslutning till tvåfassystem
Enzymet är lösligt endast i en av faserna, och
produkt - i en annan
Låter dig arbeta med hög molekylvikt
substrat.

50.

Kemiska immobiliseringsmetoder:
Bildandet av kovalenta bindningar mellan
enzym och bärare.
Fördelar:
1) Hög styrka hos konjugatet
2) Det är möjligt att öka enzymets stabilitet

51.

Vid immobilisering av enzymer är det nödvändigt
observera följande villkor:
1. Aktiva matrisgrupper bör inte
blockera enzymets katalytiska centrum.
2. Immobilisering bör inte leda till förlust
enzymaktivitet.

52.

Det är mycket lovande att använda i
som biokatalysatorer immobiliserade
celler.
Eftersom kan undvikas:
1) dyra stadier av isolering och rening
enzymer
2) behovet av deras efterföljande stabilisering

53.

Termozymer
Stabil under höga temperaturer,
höga saltkoncentrationer och extrema
pH-värden.
Hypertermofila mikroorganismer,
finns bland Archaea och Bakterier, levande
vid temperaturer på 80–100 ° С.

54.

Mekanismer är ansvariga för termisk stabilitet
enzymer i termozymer:
Mellan mesofil och termofil
versioner av enzymer - en hög grad av homologi
sekvenser och strukturer.
Således sekvenser av termostabil
dehydrogenaser från Pyrococcus och Thermotoga vid 35 och
55 % är identiska
mesofila dehydrogenassekvenser
från Clostridium.

55.

Det visade sig att dehydrogenas från Pyrococcus
furiosus (Tm == 105 ° C) innehåller 35 isoleuciner,
medan dehydrogenas från Thermotoga
maritima (Tm = 95 ° C) och Clostridium symbiosum (Tm
= 55°C) endast 21 och 20 isoleuciner
respektive.
Termostabila enzymer innehåller mindre
glycin: Cs-dehydrogenas innehåller 48 rester
glycin och dehydrogenaser endast från Tm och Pf
39 respektive 34 glyciner.
Mer isoleucin och mindre glycin.

56.

Ökad termisk stabilitet korrelerar:
1) med en ökning av styvheten hos proteinstrukturen
genom att minska halten av rester
glycin,
2) med förbättrade hydrofoba kontakter i kärnan
dehydrogenas från Pf som ett resultat av valinersättning
isoleucin. (Som ett resultat av site-directed
mutagenes som leder till isoleucinersättning
för valinmutant termisk stabilitet
minskat).

57.

Stabiliseringsmekanismer:
minimering av det tillgängliga området för den hydrofoba
proteinyta;
optimering av atomär packning av protein
molekyler (minimera förhållandet
yta / volym);
optimering av laddningsfördelning (uppnådd
tack vare elimineringen av frånstötande
interaktioner, såväl som som ett resultat av organisationen
interaktioner mellan laddningar till ett slag
nätverk)
Minska antalet depressioner

58.

Användningen av enzymer från extremofiler
Modern teknik för molekylärbiologi
och genteknik tillåter:
1) få tillräckligt med enzymer från
extremofiler för deras efterföljande
analys och praktisk tillämpning.
2) kloning och uttryck av dessa enzymer i
mesofila organismer.

59.

Stärkelse används för att göra sockerarter.
Först utförs processen vid (95–105 ° С) och vid värden
pH 6–6,5.
I nästa steg sjunker temperaturen till 60 ° C och
pH = 4,5.
Användning av termostabila enzymer (a-amylas, glukoamylas, xylosisomeras),
isolerad från hypertermofiler kommer att tillåta:
1) genomföra processen i ett steg och med en och
samma villkor
2) överge dyra jonbytare

60.

Användningen av enzymer från extremofiler:
De mest termostabila a-amylaserna var
hittas i archaea Pyrococcus woesei,
Pyrococcus furiosus, Desulfurococcus mucosus,
Pyrodictium abyssi och Staphylothermus
marinus. Amylasgener från Pyrococcus sp. var
klonas och uttrycks i E. coli och Bacillus
subtilis.

61.

Användningen av enzymer från extremofiler:
Proteolytiska enzymer
Alkaliska serinproteinaser är allmänt förekommande
används som tillsatser till tvättmedel
innebär att.
Proteinaser från extremofiler behåller
inföding vid höga temperaturer, in
förekomsten av höga koncentrationer av tvättmedel och
andra denatureringsmedel. Pyrococcus,
Thermococcus, Staphyothermus, Desulfurococcus och
Sulfolobus. Den maximala aktiviteten av dessa
enzymer visas vid temperaturer
från 90 till 110 ° С och pH-värden från 2 till 10

62.

Användningen av enzymer från extremofiler:
DNA-polymeras
Termostabila DNA-polymeraser används
i PCR och spelar en viktig roll inom genteknik.
Termostabila polymeraser har hittats i
hypertermofiler Pyrococcus furiosus och Pyrococcus
litoralis, samt termofilerna Thermus aquaticus.

sökresultat

Hittade resultat: 25841 (0,82 sek)

Fri tillgång

Begränsad åtkomst

Licensförnyelse håller på att förtydligas

1

PROTEINHÄMMARE AV PROTEOLYTISKA ENZYMER ABSTRAKT DIS. ... DOKTORER I BIOLOGISKA VETENSKAPER

Syftet med detta arbete är att studera de subtila mekanismerna för proteashämmarreaktionen. Studiet av de biologiska funktionerna hos proteolysinhibitorer, särskilt i högre växter, liksom studiet av möjligheterna att använda immobiliserade proteininhibitorer som biospecifika sorbenter för isolering av proteolytiska enzymer från olika föremål med metoden för affinitetskromatografi är extremt viktig både ur teoretisk och praktisk synvinkel.

Upprepad behandling av fermepten med ättiksyraanhydrid leder emellertid till fullständig inaktivering.<...>Värdet av resterna, bildandet av enzymernas katalytiska centrum.<...>Fritt enzym 2. Enzym + extrakt 3. Enzym * zlgat pH 7,6 4.<...>processen för introduktion eller lagring kan: leda till bildning av modifierade former av enzymer eller till inaktivering av dem<...>(Oteuka, Price, 1974; Prlngle.,. 1975) I laboratoriet: praxis för inaktivering av samtidiga proteaser

Förhandsvisning: PROTEINHÄMMARE AV PROTEOLYTISKA ENZYMER.pdf (0,0 Mb)

2

PEPTIDER OCH DERAS INTERAKTION MED AMINOACIL-RNA-SYNTETASER ABSTRAKT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Moskva: LOMONOSOV MOSKVA STATE UNIVERSITY

Slutsatser. 1. Enzymatisk hydrolysat av olika proteiner har en stimulerande effekt på tillväxten av mikroorganismen Z. cassi. Storleken på den stimulerande effekten beror både på typen av protein och på vilken typ av enzym som hydrolyserar.

Reaktionen fortskrider enligt följande. enzym + AT9 * I0OS-CH (III) -R ^ * enzym -AMP-OC-BHM) - /?<...>JpH-5-enzym j deucin / md 1 j före inkubation; efter in; hydrolys I!<...>T2-paratater av aktiverande enzymer.<...>/ påverkan av koncentrationen av substratet, enzym, AT $ och Mp, substratspecificitet /.<...>"Arten av peptidaser som ingår i pH-5 enzympreparat från råttlever".

Förhandsvisning: PEPTIDER OCH DERAS INTERAKTION MED AMINOACIL-RNA SYNTHETASES.pdf (0,0 Mb)

3

ISOLERING OCH KARAKTERISTIKA FÖR PLATSSPECIFIK ENDONUKLEASIS AV BEGRÄNSNING FRÅN CYANOBAKTERIER I NORMAL OCH VIRAL INFECTION ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

LENINORDER OCH ORDNING OM VÄNSKAP AV FOLK VETENSKAPSAKADEMY I UKRAINISKA SSR

Syftet med vårt arbete var att studera några aspekter av interaktionen av den virulenta cyanofagen N-2 med cellerna från den heterocystfilamentösa cyanobakterien Nortoc linckia, st. Rlenk 387/7. Samtidigt ägnades stor uppmärksamhet åt studiet av cellulära och virusinducerade restriktionsenzymer och enzymatisk hydrolys av värd-DNA under infektion.

Problemet med att söka efter nya enzymer har dock inte förlorat sin relevans.<...>Bestäm igenkänningsställena och klyvningspunkten för de renade restriktionsenzymerna. 4.<...>Igenkänningsställen har fastställts och skärpunkten för Nil 387/7 I-enzymet.<...>och 0,7-0,82 M NaCl för ett annat enzym.<...>"Metoder för produktion, analys och användning av enzymer." Jurmala, 1990. S. 4 2. 5 . Melnik A.I.

Förhandsgranskning: ISOLERING OCH KARAKTERISTIKA FÖR PLATSSPECIFIKA ENDONUKLEASBEGRÄNSNINGAR FRÅN CYANOBAKTERIER I NORMAL OCH VIRAL INFECTION.pdf (0,0 Mb)

4

T-LYMFOCYTER VID ÅTERSTÄLLANDE AV REPRODUKTIVA FUNKTIONER HOS KOR EFTER HOTEL ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

ALLRYSSISK STATSFORSKARE

Syftet med detta arbete var att fastställa den möjliga förekomsten av direkt antibakteriell aktivitet mot extracellulära patogener i nötkreaturs T-lymfocyter; studie av T-lymfocyternas immunskyddande roll vid återställandet av reproduktionsfunktionen hos kor efter kalvning, samt ta reda på möjligheten att minska återhämtningstiden för denna funktion genom att aktivera livmodervävnadernas lokala immunitet.

första insemination nummer 7 6 % 50,0 ± 13,3 40,1 ± 12,6 per 90 dagar. nummer 12 11 % 85,8 ± 9,3 73,3 111,4 "inaktivering<...>första inseminationstalet 23 16 % 53,5 ± 7,6 42,1 ± 8,0 under 90 dagar. nummer 39 23 % 90,7 ± 4,4 * 71,1 ± 7,4 * inaktivering

Förhandsvisning: T-LYMFOCYTER I ÅTERSTÄLLANDE AV REPRODUKTIVA FUNKTIONER I KO EFTER HOTEL.pdf (0,0 Mb)

5

UTVECKLING AV NYA METODER FÖR STABILISERING OCH KONTROLL AV WINE ABSTRACT DIS. ... DOKTORER I TEKNISKA VETENSKAPER

ALL-UNION ORDER OF LABOR RÖD BANNER FORSKNINGSINSTITUTET FÖR VIN OCH VINGÅRDER "MAHARACH"

Syftet med arbetet. Metodologiskt baserades lösningen på problemet med vinstabilisering på ett systematiskt tillvägagångssätt för att bedöma vinernas potentiella instabilitet för enskilda typer av grumlighet och deras komplexa manifestation, följt av utvecklingen av nya metoder för vinstabilisering från denna bas.

1967), om All Union Sozetanip om biosyntesen av enzymer av mikroorganismer och deras användning i folk<...>När innehållet av kalese i mediet är 20-30 mg / d, reduceras enzymets aktivitet med hälften.<...>enzymer.<...>Under 21 dagars kontinuerlig drift av reaktorn minskade enzymets aktivitet med hälften.<...>SOM. 536192 (USSR) Metod för enzymimmobilisering (Pavlenko H.

Förhandsvisning: UTVECKLING AV NYA SÄTT FÖR STABILISERING OCH KONTROLL AV WINE.pdf (0,0 Mb)

6

B-GLUKOSIDASE AV SVAMPEN GEETRIOHWIS CAADIDNE ЗС ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

M .: USSR AKADEMI FÖR VETENSKAPER ORDNING AV LENIN INSTITUTE OF BIOCHEMISTRY UPPHANDD EFTER A. N. BAKH

Studiens syfte och mål. Syftet med detta arbete var att studera de multipla formerna av β-glukosidas i det kommersiella enzympreparatet Cellocandin I 10x, erhållet från filtratet av odlingsvätskan från den cellulosanedbrytande svampen Geo trichura oandidum ZS.

enzymmolekyl, sammansättningen av kolhydratkomponenten i molekylen.<...>Enzymutbytet var cirka 9 % i termer av aktivitet och 0,13? protein.<...>Det isolerade enzymet är tachocyanin / 3 -hydrozidazo £: enzymet kopplade inte bort polysackariden (arabogdezuroEoxylan<...>Wtsroo Bseseyazn. soos. på enzymerna hos hakrororganismer. Minsk, 1978, oktober, sammandrag. rapporter, sid. 76,4.<...>"Metoder för att erhålla högrenade enzymer". -Vilnius, 1973, tå. Dokl., s. 94-95. 5.

Förhandsvisning: B-GLUKOSIDASE AV SVAMPEN GEETRIOHWIS CAADIDNE З.pdf (0,0 Mb)

7

EFFEKTIVITETEN I ANVÄNDA BIOKEMISKA INDIKATORER FÖR BLOD FÖR ATT UPPSKATTA AVELSKVALITETERNA HOS Rams of the Karakul Breed AUTO ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR JORDBRUKSVETENSKAP

ALL-FONDENS FORSKNINGSINSTITUT FÖR DJURHÅLLNING

Syftet med denna studie är att utveckla en vetenskapligt grundad metod för att bedöma Karakul-fåren efter kvaliteten på avkomman genom att välja djur för deras biokemiska individualitet.

Efter bestämning av enzymaktiviteten Copyright JSC "CDB" BIBKOM "& LLC" Agency Book-Service "<...>Av dessa, 6 huvuden med hög aktivitet av enzymet aspartataminotransferas, 6 huvuden med ett genomsnitt och 6 huvuden<...>Aktiviteten hos blodenzymerna hos baggar berodde också på ZEONITS ålder.<...>Enzymaktivitet 1<...>Inre tecken på utvecklingen av Karakul-får, vilket kan tillskrivas aspartatenzymer

Förhandsvisning: EFFEKTIVITET ATT ANVÄNDA BIOKEMISKA INDIKATORER FÖR BLOD VID UTVÄRDERING AV AVELSKVALITETER HOS KARAKUL-RASEN BARAN.pdf (0,0 Mb)

8

KOMPATIBILITET AV GENOMEN AV NÅGRA ARTER AV TETRAPLOID OCH TEXAPLOID VETE MED T. TIMOPHEEVI CYTOPLASM ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

M .: MOSKVA ORDEN AV LENIN OCH ARBETSORDNING RÖD BANNER LANDBRUKSAKADEMIEN UPPFYLLD EFTER K.A.TIMIRYAZEV

Mål: 1. Att studera förenligheten av genomen hos vissa arter av hexaploid och tetraploid vete med cytoplasman hos T. timopheevi och samtidigt försöka isolera effekten, interaktionen av själva genomen; 2. Att studera meios och mikrosporogenes i fertila former och former erhållna från korsning; CMS linje X-vy. 3. Att genomföra en cytokemisk studie av de generativa organen i fertila former och deras sterila analoger (när det gäller den steriliserande verkan av cytoplasman hos T. timopheevi) hos vissa vetearter.

1,0 1,5 2,0 1,0. 1.5 1.2 1.1 Copyright OJSC "Central Design Bureau" BIBKOM "& LLC" Agency Book-Service "Enzymaktivitet<...>Enzymer.<...>enzymer.<...>Enzymaktivitet bestämdes i pollen, äggstockar och stigma. Peroxidas.<...>En minskning av innehållet av ett antal ämnen och enzymer i äggstockarna och stigmas av pistiller av sterila former av vete är

Förhands: FÖRENLIGHET genomen av vissa arter av tetraploida OCH TEXAPLOID vete med T. TIMOPHEEVI CYTOPLASM.pdf (0,0 Mb)

9

JÄMFÖRANDE DATA OM AKTIVITETEN HOS NÅGRA GLYKOLYTISKA ENZYMER I Tjur- och vildsperma ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

LVIV ZOOVETERINÄRA INSTITUT

Denna artikel presenterar resultaten av en jämförande studie av aktiviteterna av adenosintrifosfatas, fosfohexoisomeras, fosfoglukomutas, aldolas och fruktos-1,6-difosfatas i sperma från nötkreatur och vildsvin, såväl som effekten av det sexuella utnyttjandet av producenter på aktiviteten hos de studerade enzymerna.

Placeringen av enzymer mellan könscellerna och plasman är inte heller densamma.<...>Detta enzym finns i spermier hos båda djurarterna.<...>(Enzymets P minskade.<...>Högt innehåll av enzymet ATP-as i 10.<...>Effekten av insulin på aktiviteten av vissa enzymer i bovina spermier.

Förhandsvisning: JÄMFÖRANDE DATA OM AKTIVITETEN HOS VISSA GLYKOLYTISKA ENZYMER I BULL AND BOOM SPERM.pdf (0,0 Mb)

10

DETEKTION OCH NÅGRA FUNKTIONER I DET PROTEOLYTISKA KOMPLEXET AV ACTINOMYCETES ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Mål för arbetet. Detta arbete ägnas åt studiet av några egenskaper hos det proteolytiska komplexet av aktinomyceter

.; :, "Dessa enzymer spelar en viktig reglerande roll i koordinationen av cirkulationen (sönderfall £ r = 5 syntes<...>";." Källor till enzymer olugidia "" v7;> ^ ".;". "-".<...>Preliminär rening av det mjölkinnehållande enzymkomplexet utfördes enligt den allmänt accepterade metoden<...>Det optimala pH-värdet för manifestationen av ".- .: enzymaktivitet." "" "" ".<...>actinomi -.; .. ^ workshops, liksom liknande enzymer från andra mikroorganismer, hade bredare intervall

Förhandsgranskning: IDENTIFIKATION OCH NÅGRA FUNKTIONER HOS ACTINOMYCETIC PROTEOLYTIC COMPLEX.pdf (0.0 Mb)

11

BIOLOGISK AKTIVITET HOS SODDY-PODZOLY JORDAR OCH DESS FÖRÄNDRING UNDER PÅVERKAN AV TORVBLANDNINGAR ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR JORDBRUKSVETENSKAP

VITRYSSISK ARBETSORDNING RÖD BANNER AGRICULTURAL ACADEMY

BIOLOGISK AKTIVITET HOS SODDY-PODZOLY JORDAR OCH DESS FÖRÄNDRING UNDER PÅVERKAN AV TORRVBLANDNINGAR

Markenzymernas aktivitets beroende av miljöförhållanden Enzymens aktivitet beror på ett antal faktorer<...>Detta är manifestationen av en av de karakteristiska egenskaperna hos enzymer - labilitet.<...>Men om dessa beroenden för organismens enzymer har klargjorts ganska fullständigt, då för markenzymerna<...>Miljöförhållanden har en betydande effekt på enzymaktiviteten i marken.<...>Tvärtom leder en minskning av markfuktigheten till en minskning av aktiviteten hos dess enzymer.

Förhandsvisning: BIOLOGISK AKTIVITET HOS SODDY-PODZOLY JORDAR OCH DESS FÖRÄNDRING UNDER PÅVERKAN AV TORSBLANDNINGAR.pdf (0,0 Mb)

12

FYSIOLOGISK MOTIVERING AV KOMBINATIONEN AV ROT-SUPPLEMENTERING AV JORDBRUKSVÄXTER MED DERAS KEMISKA TILLSATS (På EXEMPEL AV MAJS OCH PROSA) ABSTRAKT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Vi gjorde ett försök att studera de fysiologiska grunderna för kombinationen av bladmatning av jordbruksväxter med deras kemiska ogräsrensning i nära anslutning till problemen med biokemi, biofysik och växtodling. Denna avhandling ägnas åt teorin och praktiken av den kombinerade användningen av mineral (gödselmedel och herbicider i grödor av majs och hirs).

13,9 14,8 L «100 135,1 143,3 152,6 Experiment har också visat en ökning av aktiviteten hos andra andningsenzymer<...>I våra experiment motsvarade andningsintensiteten som regel aktiviteten hos oxidativa enzymer<...>I framtiden ökar aktiviteten hos dessa enzymer: Tillsätt kvävegödsel till herbicidlösningen<...>mjukar upp den initierande effekten av 2,4-diklorfenoxiättiksyra på aktiviteten av oxidativa enzymer<...>växter: "vattenutbyte, fotosyntes, syntes av fytokromer, andning och aktivitet hos vissa oxidativa enzymer

Förhandsvisning: FYSIOLOGISK MOTIVERING AV KOMBINATIONEN AV ROTMATNING AV JORDBRUKSVÄXTER MED DERAS KEMISKA SUPPLEMENT (PÅ EXEMPEL AV MAJS OCH PROSA) .pdf (0,0 Mb)

13

NÅGRA INDIKATORER PÅ KOLHYDRATUTBYTE HOS KYCKLINGAR BEROENDE PÅ ÅLDER OCH FYSIOLOGISKT TILLSTÅND PÅ KROPPEN ABSTRAKT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

KHARKIV ZOOVETERINÄRA INSTITUTET

Denna artikel presenterar resultaten av studier av vissa aspekter av kolhydratmetabolism hos ryska vita kycklingar i slutet av embryogenesen och under en relativt lång period av deras postnatala ontogenes.

Åldersrelaterad dynamik i innehållet i de viktigaste kolhydratmetaboliterna och aktiviteten hos kolhydratenzymer<...>Omsättningen av kolhydrater i äggledaren, liksom aktiviteten hos motsvarande enzymer i<...>Enzymaktiviteten uttrycktes i μg fosfor per 100 mg vävnad.<...>Sålunda, under embryogenesperioden, är enzymets aktivitet jämförelsevis låg.<...>Det är känt. att detta enzym spelar en roll i syntesen av glykogen. /. ...

Förhandsvisning: NÅGRA INDIKATORER PÅ KOLHYDRATUTBYTE HOS KYCKLINGAR BEROENDE PÅ KROPPENS ÅLDER OCH FYSIOLOGISKT TILLSTÅND.pdf (0,0 Mb)

14

METODER FÖR KEMISKA IMMUNISERING AV TOBAKS TILL SVART ROT ROT ABSTRAKT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

KHARKOV ARBETSORDNING RÖD BANNER JORDBRUKSINSTITUT UPPFYLLD EFTER V.V. Dokuchaev

METODER FÖR KEMISK IMMUNISERING AV TOBAKS TILL SVART ROT ROT

Försåddsbehandling Aktiverar VV-enzymer i växter, "som" har en positiv effekt "på flödet<...>Med nederlaget för svartrotröta sker en förändring i aktiviteten hos andningsenzymer "i växter

Förhandsvisning: METODER FÖR KEMISKA IMMUNISERING AV TOBAKS TILL SVART ROT ROT.pdf (0,0 Mb)

15

KANINMUSKEL GLYKOGEN FOSFORYLAS - KVARTERNÄR STRUKTUR OCH REGLERINGSEGENSKAPER ABSTRAKT DIS. ... DOKTORER I BIOLOGISKA VETENSKAPER

Moskva: ORDENA OF LENIN INSTITUTE OF BIOCHEMISTRY UPPGIFT EFTER A. N. BAKH

I föreliggande undersökning ställdes i huvudsak följande uppgifter. 1. Studie av förutsättningarna för dissociation av fosforylaser B och A från kaninmuskler till subenheter för att få ytterligare information om enzymets kvartära struktur, subenheters egenskaper och bindningarnas karaktär mellan dem. 2. Förtydligande av frågan om deltagande av pyridoxal-5-fosfat i upprätthållandet av den kvartära strukturen av fosforylas.

Fosforylas tillhör klassen av regulatoriska enzymer med en ". Kvartär struktur."<...>Detta kan förklaras av den specifika effekten av cystein på enzymets struktur.<...>Den tredje typen av lager observeras främst på betorberedda enzympreparat.<...>Inducerad optisk aktivitet av vissa pyridoxala enzymer.<...>Kemisk modifiering av enzymer som ett av sätten att reglera deras aktivitet.

Förhandsvisning: KANINMUSKEL GLYKOGEN FOSFORYLAS - KVARTERNÄR STRUKTUR OCH REGLERANDE EGENSKAPER.pdf (0,0 Mb)

16

Kinetiken för termisk inaktivering av glutationperoxidas av typ I, ett enzym som spelar en nyckelroll i kroppens antioxidantförsvarssystem, har studerats. Det har visats att vid 37°C inaktiveras oligomert glutationperoxidas av en monomolekylär mekanism. En effektiv metod för att stabilisera enzymet med användning av polyelektrolyter av olika natur har föreslagits.

Det var vid detta pH-värde som de kinetiska mönstren för enzyminaktivering undersöktes.<...> <...>Det visade sig att i närvaro av 1-, 10- och 100-faldigt överskott av ovanstående polymerer, inaktivering av enzymet<...> <...>

17

STUDERA MEKANISMEN FÖR FOTODYNAMISK INAKTIVERING AV ENZYMER ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Syftet med denna studie var att experimentellt verifiera detta antagande, att bevisa förekomsten av latent skada på proteinsubstratet i PDE, att studera deras natur och bidrag till total skada, samt att studera effektiviteten av fotodynamisk skada på proteiner (kvantum). utbyte), en praktiskt taget outforskad, inte desto mindre viktig fråga. för att klargöra både mekanismen för cellens fotodynamiska reaktion och de strukturella egenskaperna hos proteinsubstratet

<...>KONDAKOVA Studie av mekanismen för fotodynamisk inaktivering av enzymer<...>Belysning av lösningar av myosin med metylenblått i luft leder till inaktivering av enzymet enligt lagen,<...>Återställande av färg åtföljs av partiell inaktivering av enzymet ("syre" eftereffekt) i<...>För detta ändamål studerades vinrankornas beroende av enzyminaktivering i ett brett spektrum av deras koncentrationer:

Förhandsvisning: STUDERA MEKANISMEN FÖR FOTODYNAMISK INAKTIVERING AV ENZYMER.pdf (0,0 Mb)

18

STUDERA MEKANISMEN FÖR STRÅLNINGSINAKTIVERING AV ENZYMER ABSTRACT DIS. ... DOKTORER I BIOLOGISKA VETENSKAPER

M .: INSTITUTET FÖR BIOLOGISK FYSIK I USSR:s vetenskapsakademi

Från jämförelsen och analysen av resultaten som ges i avhandlingen presenteras tvåstegsprocessen av strålningsinaktivering av enzymer enligt följande (kapitel 13). I det första steget av inaktivering omfördelas den elektroniska laddningen i proteinmolekylen med bildandet och lokaliseringen av en elektronisk vakans.

E & D U S STUDERA MEKANISMEN FÖR STRÅLINGSINAKTIVERING AV ENZYMER<...>E Y D U S STUDERA MEKANISMEN FÖR STRÅLNINGSINAKTIVERING AV ENZYMER Författarens sammandrag av avhandlingen om vetenskapsmannens konkurrens<...>Således, för inaktivering av enzymer både i den "indirekta" och "direkta" verkan av strålning<...>(Latent skada på grund av strålningsinaktivering av enzymer).<...>Syrets deltagande i strålningsinaktivering av torra enzymer. Radiobiologi. 4, 44. Eidus L. X. 1964.

Förhandsgranskning: STUDERA MEKANISMEN FÖR STRÅLEINAKTIVERING AV ENZYMER.pdf (0,0 Mb)

19

Sammanfattning. Antibiotikaresistens bland mikroorganismer från Enterobacteriaceae-familjen beror på en kombination av flera mekanismer, till exempel överproduktion av betalaktamaser, en minskning av permeabiliteten hos det yttre membranet av en mikrobiell cell (vanligtvis förknippat med förlust av porinproteiner), och närvaron av ett utflödessystem. Särskilt anmärkningsvärt är metallo-beta-laktamaser (MBL), vars närvaro bestämmer resistensen hos gramnegativa mikroorganismer mot alla beta-laktamantibiotika (i vissa fall, förutom aztreonam). För närvarande finns det inga MBL-hämmare av karbapenemresistenta mikroorganismer godkända för användning på kliniken. Sökandet efter effektiva MBL-hämmare av karbapenemresistenta mikroorganismer, godkända för användning på kliniken och som förstärker effekten av karbapenemer, låg till grund för denna studie. Arbetet utfördes i 3 steg: 1) skapande av ett modellsystem med användning av ett standardreagens av P. aeruginosa metallo-beta-laktamas enzymrekombinant, uttryckt i E. coli, för att bedöma ökningen av de minsta hämmande koncentrationerna (MIC) ) av karbapenemer i förhållande till tidigare känsliga gramnegativa stammar av mikroorganismer in vitro; 2) utvärdering av effektiviteten av lovande MBL-hämmare i närvaro av samma standardenzymreagens; 3) bedömning av förmågan hos de identifierade hämmarna att förstärka effekten av karbapenemer mot kliniska isolat av gramnegativa mikroorganismer som producerar MBL, enligt parametrarna för MIC och index för fraktionerad hämmande koncentration (FIC). Standard schackbrädemetoden modifierades för att utvärdera den kombinerade användningen av ett antibiotikum från karbapenemgruppen och en potentiell hämmare av MBL, ett bisfosfonatläkemedel, etidronsyra. Med hjälp av ett standardreagens av det rekombinanta metallo-beta-laktamasenzymet P. aeruginosa, uttryckt i E. coli, skapades ett modellsystem som gör det möjligt att bedöma utsikterna för nya MBL-hämmare av gramnegativa mikroorganismer. En dosberoende effekt av en ökning av MIC-nivån av meropenem på mängden MBL-reagens i modellsystemet avslöjades i relation till referensmikroorganismer som tidigare var känsliga för antibiotika. Inaktivering av MBL-enzymet noterades även med små doser av bisfosfonat, studierna visade en fördröjning i uppkomsten av den logaritmiska tillväxtfasen av P. aeruginosa ATCC 27853-testkulturen upp till 12 timmar jämfört med kontrollen. Samtidigt hämmade de maximala doserna av etidronsyra på 50 000–100 000 μg / ml MBL fullständigt; frånvaron av den logaritmiska fasen av mikrobiell tillväxt observerades på grund av verkan av meropenem på nivån för referenskänslighetsvärdet (2 μg) /ml). En synergistisk effekt avslöjades (FIK-index

Inaktivering av MBL-enzymet noterades även med små doser av bisfosfonat; studier har visat en fördröjning<...>Från och med den 4:e raden minskade intensiteten av inaktivering av enzymet, och i den 8:e raden, frånvaron av<...>Med början från den 5:e raden minskade intensiteten av enzyminaktivering, och i den 8:e raden noterades ingen tillväxt.<...>I celler utan etidronsyra noterades tillväxten av teststammen på grund av inaktivering av antibiotikan av enzymet<...>Avslöjade inaktivering av MBL-enzymet även med små doser bisfosfonat.

20

LIPAS AV GRODEN AV DESS VETEFRÖ: FÖRBEREDELSE, EGENSKAPER, REGLERING AV AKTIVITET ABSTRAKT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

VORONEZH STATE UNIVERSITY

Syftet med avhandlingsarbetet var att erhålla lipas från vetegroddsfrön i ett homogent tillstånd, att studera dess fysikalisk-kemiska egenskaper, reglering av aktivitet, samt att utveckla och underbygga rationella sätt att lagra och använda vetegroddar i livsmedelsindustrin, med hänsyn till lipasens katalytiska egenskaper.

Bestämning av enzymaktivitet.<...>syra och termisk inaktivering studerades i intervallet pH 4-8,5 och temperaturer på 20-60 ° C.<...>En ökning av temperaturen till 60 ° C ledde till en skarpare inaktivering av enzymet: under 1 timmes inkubation vid<...>Studiet av kinetiken för syrainaktivering gjorde det möjligt att beräkna hastighetskonstanterna för inaktivering i de studerade<...>I fig. 3 visar Arrhenius-diagram som indikerar termisk inaktivering av lipas.

Förhandsgranskning: LIPAS AV GRODEN AV HENNES VETEFRÖBEREDNING, EGENSKAPER, REGLERING AV AKTIVITET.pdf (0,0 Mb)

21

LIPOLYTISK AKTIVITET HOS MJÖLKBETRÄKNINGSBEREDNINGAR OCH DESS ROLL I BILDANDET AV OSTKVALITETSABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR TEKNISK VETENSKAP

LENINGRAD TEKNOLOGISKA INSTITUTET FÖR KYLINDUSTRIN

Vetenskaplig nyhet av arbetet. För första gången har ett kriteriesystem för att bedöma lämpligheten av mjölkkoagulationspreparat för osttillverkning genom deras lipolytiska egenskaper utvecklats (Inventory Certificate No. 1040702 USSR). Lipasaktiviteten hos preparat av olika ursprung och dess beroende av pH och temperatur har studerats. Kinetiken för inaktivering av koagulation och lipolytiska aktiviteter i vissa läkemedel under påverkan av temperatur och ultraviolett strålning har undersökts. Specificiteten för lipaser av läkemedel som koagulerar mjölk har fastställts. Sambandet mellan lipolysindikatorer och kvaliteten på ostar har avslöjats.

Kinetiken för inaktivering av koagulation och polypolytiska aktiviteter i vissa läkemedel under<...>Kinetik för inaktivering - genom att mäta restaktiviteten hos enzymer (I.B. Berezin, L.L.<...>komplex) och förstärkning av termisk inaktivering av enzymet vid tillräckligt höga temperaturer.<...>om inaktivering av enzymer under påverkan av UV-bestrålning (tabell 4).<...>Ingen märkbar inaktivering av lipolytiska enzymer genom ultraviolett bestrålning detekterades

Förhandsgranskning: LIPOLYTISK AKTIVITET HOS MJÖLKBETRÄKNINGSBEREDNINGAR OCH DESS ROLL I FORMNING AV OSTKVALITET.pdf (0,0 Mb)

22

STUDIE AV INFORMATIONSFAKTORENS ROLL I FOTOINAKTIVERING AV PROTEINS ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

INSTITUTE OF EXPERIMENTAL BOTAICS OF THE ACADEMY OF SCIENCE OF BSSR

Syftet med detta arbete var 1) en systematisk studie av sambandet mellan konformationstillståndet hos proteinmolekyler och nivån på deras ljuskänslighet; 2) experimentell verifiering av möjligheten att använda elektronisk excitationsenergi för fotoinaktivering av proteiner, som avaktiveras längs en icke-strålningsväg.

Som regel minskade kvantutbytet av inaktivering av de studerade proteinerna vid tillsats av salter.<...>Många författare har noterat en ökad stabilitet hos enzymer i sammansättningen av enzym-substratkomplex med avseende på<...>inaktivering mot bakgrund av skydd och aktivering.<...>Y-b-inaktivering manifesteras endast vid ganska betydande doser av Y-ljus.<...>På den skyddande effekten av substratet under ultraviolett inaktivering av vissa enzymer.

Förhandsvisning: STUDERA INFORMATIONSFAKTORENS ROLL I FOTOINAKTIVERING AV PROTEIN.pdf (0,0 Mb)

23

En heterogen biokatalysator baserad på inulinas immobiliserat på den nonjoniska sorbenten Stirosorb föreslås. Termisk och sur inaktivering av fritt och immobiliserat inulinas utfördes. Motsvarande värden för inaktiveringskonstanterna beräknades. En ökning av den termiska stabiliteten för det immobiliserade enzymet i jämförelse med det fria avslöjades. Med hjälp av metoden för IR-spektroskopi övervägs inverkan av termisk inaktivering på enzymets struktur.

Termisk och syrainaktivering av nativa och immobiliserade enzymer utfördes genom termostatering<...>Figur 1 visar dynamiken i processen för inaktivering av fritt och immobiliserat enzym vid temperaturer<...>Inaktivering av enzymer är i de flesta fall en första ordningens reaktion och beskrivs av ekvationen<...>För det immobiliserade enzymet noterades en minskning av inaktiveringskonstanten jämfört med det nativa enzymet<...>På enzymets spektrogram vid inaktivering (70 ° C) i 30 minuter, en signifikant ökning av

24

Nr 3 [Bulletin från Moskvas universitet. Serie 2. Chemistry, 2014]

Tidskriften publicerar artiklar av både universitetspersonal och författare från andra organisationer i Ryssland och runt om i världen. Ämnen för publikationer täcker alla grenar av kemi.

Baserat på data om mekanismen för enzyminaktivering utvecklades kompositioner av nonjoniska ytaktiva ämnen.<...>Baserat på data om mekanismen för inaktivering av antistafylokockenzymet LysK, metoder för<...>T. 55. Nr 3 av vilken man kan se att inaktiveringen av enzymet fortskrider i första ordningen med en inaktiveringskonstant<...>Inaktiveringskonstanterna ökar signifikant med en ökning av molförhållandena för PLPEG:enzym<...>Den konstanta inaktiveringen av enzymet i närvaro av polyakrylsyra minskar ungefär

Förhandsvisning: Bulletin of Moscow University. Series 2. Chemistry No. 3 2014.pdf (2,2 Mb)

25

Med hjälp av Dixons metoder och kemisk modifiering avslöjades rollen för imidazolgruppen av histidin, w-karboxylgrupper av asparaginsyra och glutaminsyror, sulfhydrylgrupper av cystein i hydrolysen av triglycerider. Det har visats att etylendiamintetraacetat är en icke-kompetitiv lipasinhibitor

blått bör leda till inaktivering av enzymet, vilket observerades i våra experiment.<...>Lipasbehandling med ditiontrobensen leder till modifiering av enzymets SH-grupper och dess inaktivering.<...>Partiell lipasinaktivering observerades vid blockering av SH-grupper med p-klorkvicksilverbensoat.<...>Partiell inaktivering av enzymet vid blockering av sulfhydrylgrupper indikerar deras bidrag till<...>Rollen av proteinfunktionella grupper i enzymer // Enzymer. M .: Vetenskap. 1964. S. 101-118.

26

Den termiska inaktiveringen av glukoamylas studerades med användning av den spektrofotometriska metoden, digitala metoder för differentiell termisk analys (DTA), etc. Den termiska stabiliteten för detta enzym visades inom ett brett temperaturområde. Bekräftade närvaron av en kvartär struktur av glukoamylas, representerad av två subenheter

FORSKNING AV PROCESSEN FÖR TERMISK INAKTIVERING AV GLUKOAMYLAS VESTNIK VSU.<...>Serie av kemi, biologi, farmaci 2003. Nr 1. sid. 57 - 60 UDC 577.154.31 FORSKNING AV PROCESSEN FÖR TERMISK INAKTIVERING<...>Vi har undersökt den termiska inaktiveringen av glukoamylas vid temperaturer på 50, 60, 70 ° C.<...>Hastigheten för inaktivering av enzymet i lösning ökar snabbt med en ökning av temperaturen från 500 C till 700 C<...>Dessa data indikerar att termisk inaktivering av glukoamylas är en typisk

27

PÅVERKAN AV ERSÄTTNING AV MET-RESTER PÅ LEU-RESTER PÅ KATALYTISKA EGENSKAPER, OXIDATIV OCH TEMPERATURSTABILITET HOS D-AMINOSYROR OXIDASJÄST [Elektronisk resurs] / Atroshenko [et al.] // Bulletin of Moscow University Serie 2. Kemi .- 2016 .- Nr 4.- P. 47-57 .- Åtkomstläge: https: // hemsida / efd / 373180

Den oxidativa stabiliteten hos enzymer bestäms primärt av Cys- och Met-resterna. I fallet med D-aminosyraoxidas (DAAO, EC 1.4.3.3) från jästen Trigonopsis variabilis (TvDAAO), erhölls tre muteiner med punktsubstitutioner av Met-resten med Leu-resten genom metoden för riktad mutagenes. Valet av positioner för införandet av substitutionen gjordes på basis av multipla anpassningar av DAAO-aminosyrasekvenser från olika källor, såväl som analys av den tredimensionella strukturen hos TvDAAO. För de erhållna mutanterna studerades katalytiska egenskaper, såväl som temperatur och oxidativ stabilitet. I samtliga fall ledde substitutionen till en förändring i substratspecificitetsprofilen för de muterade enzymerna. Det finns en märkbar ökning av Michaelis-konstanterna för små substrat och en minskning av CM för D-aminosyror med en skrymmande sidoradikal. Det visades att, som ett resultat av en av substitutionerna, ökade temperaturstabiliteten för TvDAAO med 2–3 gånger jämfört med vildtypsenzymet. En metod för att bestämma stabiliteten hos TvDAAO mot verkan av väteperoxid har utvecklats. Den oxidativa stabiliteten hos vildtypsenzymet och den resulterande mutanta TvDAAO studerades. Det visade sig att i samtliga fall hade ersättningen av Met-resten med Leu-resten en obetydlig effekt på enzymets oxidativa stabilitet.

Inaktivering av mutant TvDAAO och vildtypsenzym i närvaro av väteperoxid studerades i 0,05 M<...>två exponentiella funktioner, och hastigheten för enzyminaktivering beror på dess koncentration

Den enda vetenskapliga och tekniska och informativa och analytiska månadstidningen i Ryssland och OSS-länderna om vetenskaplig och teknisk utveckling inom alla områden av kylning, kryogen utrustning och teknologi, luftkonditionering och ventilation, automation och kontroll, återtransport, processer och livsmedelsproduktion utrustning, arbetsämnen, problem med ekologi och energibesparing. I mer än 100 år har tidskriften varit den primära källan till information om grundläggande och tillämpade verk av ledande inhemska och utländska forskare, liksom publikationen för publicering av resultaten av avhandlingar för graden av kandidat och doktor i vetenskaper. Tidskriften ingår i den internationella abstraktsdatabasen Agris, registrerad i Russian Science Citation Index (RSCI).

Nyckelord: mikrovågsbehandling, inaktivering av peroxidas och oxidas, nyskuren potatis, lägen<...>I detta fall är det tillrådligt att ställa in den optimala tiden för behandling med ett mikrovågsfält, så att inaktiveringsprocessen<...>enzymer ledde inte till överdriven uppmjukning av produktvävnaden.<...>Inaktivering av peroxidas på ytan och inuti bitarna skedde först efter 3 minuter (fig. 3d), när<...>Således, enligt resultaten av studier av inaktivering av enzymer och mikroorganismer, det optimala läget

Förhandsvisning: Kylutrustning №8 2019.pdf (0,5 Mb)

32

"PROBLEM" "IGENKÄNNING" ": AMINOACIL-TRNA-SYNTETASER OCH DERAS INTERAKTION MED TRNK" ABSTRACT DIS. ... DOKTORER I BIOLOGISKA VETENSKAPER

Moskva: ORDEN FRÅN LENIN INSTITUTE OF BIOCHEMISTRY UPPGIFT EFTER A. N. BAKH FRÅN USSR:s vetenskapsakademi

VIKTIGA resultat 1. Utgångspunkten för den experimentella studien av problemet med igenkänning är utvecklingen av metodologiska grunder för studiet av aminoacyl-tRNA-syntetaser och tRNA.

". Tabell Inflytande, substrat på hastigheten för theriophoto,; inaktivering av ARSaser från råttlever, termoinaktivering<...>Men när de är närvarande tillsammans under förhållanden där ... liladѳnilag bildas, "inaktivering av enzymet<...>Ökad "inaktivering observerad i närvaro"!<...>Effekt av tRNA på fotokemisk aktivitet av APCae f från råttlever. inaktivering i frånvaro av tRNA<...>: beroende på typen av substrat och ARSase, en ökning av inaktivering, en skyddande effekt eller

Förhandsvisning: PROBLEMET MED ATT KÄNDA IGEN AMINOACIL-TRNA-SYNTETAS OCH DERAS INTERAKTION MED TRNA.pdf (0,0 Mb)

33

Allmänna bestämmelser Exokrin pankreasinsufficiens (RV) förekommer ofta i praktiken av en läkare, både en allmänläkare och en barnläkare Klassificering Efter ursprung: primär (medfödd), sekundär (förvärvad). Genom mekanismen: absolut och relativ. Primär (medfödd) exokrin pankreasinsufficiens (EPI) bildas under prenatalperioden och orsakas av nedsatt embryogenes och/eller genetiska defekter. Sekundär (förvärvad) EPI är associerad med sjukdomar som utvecklas under den postnatala perioden.

34

BIOSYNTES OCH EGENSKAPER HOS GLUCOAMYLAS ASPERGILUFS AWAMORI ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Moskva: ORDEN FRÅN LENIN INSTITUTE OF BIOCHEMISTRY UPPGIFT EFTER A. N. BAKH FRÅN USSR:s vetenskapsakademi

SLUTSATSER 1. Av det stora antalet stammar av de studerade svamparna har svampen ASPERGILUFS AWAMORI, med vilken detta arbete utfördes, en hög förmåga att bilda glukoamylas. Aktiviteten av amylolytiska enzymer i djupodlingsfisp bestämdes. awnon i olika åldrar. Samtidigt fann man att på ett medium med natriumnitrat når bildningen av glukoamylas ett maximum i en 5-dagarsodling under odling av svampen i laboratorieförhållanden, i kolvar på en gungstol och i en 3-dagars odling. kultur - under odling i fermentorer.

Inaktivering av c-amylas och glgakosyltransferas För isolering av högrenat glukoamylaspreparat<...>Genom att använda stabiliteten av glukoamylas #sp. awna-t i ett surt medium och fullständig inaktivering av * -amylas när<...>För fullständig inaktivering av glykosyltransferas krävdes en längre inkubation på minst 24 timmar<...>En metod för inaktivering av glukosyltransferas och c-amylas i Aspergillus kulturfiltrat har utvecklats<...>Transglykosylas bildas i den djupa kulten av svampen Np.ab / olup och metoder för dess inaktivering.

Förhandsvisning: BIOSYNTES OCH EGENSKAPER HOS GLUCOAMYLAS ASPERGILUFS AWAMORI.pdf (0,0 Mb)

35

BUKSKJUELPROTEINAS OCH DERAS HÄMMARE (STUDI AV PROTEINASERS SAMVERKAN MED BLODHÄMMARE. BIOKEMISKA STUDIER AV MEKANISMEN FÖR ANTI-INFLAMMATORISK VERKNING. ... DOKTORER I BIOLOGISKA VETENSKAPER

VETENSKAPSAKADEMIEN I UKRAINISKA SSR

1. Baserat på det klassiska schemat för proteinasisolering, utveckla en metod för att erhålla medicinska preparat av kristallint trypsin och kymotrypsin för intramuskulära injektioner och ge dem en fysikalisk-kemisk och farmakologisk bedömning. 2. I ett djurförsök för att studera den antiinflammatoriska, i synnerhet den avsvällande, verkan av trypsin ichnmotnisin när det administreras parenteralt, såväl som frågor relaterade till förtydligandet av vissa aspekter av mekanismen för denna verkan.

Det har konstaterats att inaktiveringen av trypsin med serum sker snabbt och utförs helt normalt<...>Som det visade sig är trypsin skyddat från spontan inaktivering av en serumhämmare.<...>Detta kan inte tillskrivas spontan inaktivering av enzymet; det är förmodligen försenat av vävnader.<...>Inhibitor II orsakar allmän enzyminaktivering.<...>övervägande med inhibitor II, som kvantitativt överväger inhibitor I och orsakar allmän inaktivering

Förhandsgranskning: PROTEINASER HOS BUKSKÖTTEL OCH DERAS HÄMMARE (STUDI AV INTERAKTIONEN AV PROTEINASER MED BLODHÄMMARE. BIOKEMISKA STUDIER AV MEKANISMEN FÖR ANTI-INFLAMMATORISK EFFEKT)

36

EGENSKAPER HOS AMINOERING RNA-SYNTETASER FINNS I PH5 ENZYMFRAKTIONER E. COLI V. ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

M .: INSTITUTET FÖR BIOLOGISK OCH MEDICINSK KEMI vid USSR Academy of Medical Sciences

EGENSKAPER HOS AMINOACIN-RNA-SYNTETASER I PH5 ENZYMFRAKTIONER E. COLI B.

Det visade sig att tiden som krävs för värmeinaktivering av de studerade aktiverande enzymerna med £ 50<...>Värmeinaktiveringstiden för £50 tyrosyl-RNA-syntetas var 30 sekunder.<...>att aktivitetsminskningen i den sura regionen (med avseende på pH-optimum x) orsakas av irreversibel inaktivering<...>olika stabilitet av amineacyl-GNK-syntetaser under inkubationen av enzympreparatet vid 0 °. 1" termisk inaktivering<...>en nedgång i aktivitet med en förskjutning i pH till surt, i förhållande till pH-optimum, regionen orsakas av irreversibel inaktivering

Förhandsvisning: EGENSKAPER HOS AMINOERING-RNA-SYNTETASER I PH5-ENZYMFRAKTIONER E. COLI B..pdf (0.0 Mb)

37

STUDIE AV BEROENDE MELLAN FYSISK-KEMISKA FÖRÄNDRINGAR I NATIVA ENZYMPROTEINER OCH DERES KATALYTISKA AKTIVITET ABSTRAKT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

INSTITUTION OF BIOCHEMISTRY vid Vetenskapsakademin i den ukrainska SSR

Slutsatser 1. Närvaron av urea i inkubationsblandningen vid en koncentration på upp till 0,166 M påverkar inte aktiviteten av aldolas. En ökning av dess innehåll orsakar en minskning av enzymets aktivitet, vilket är i direkt proportion till koncentrationen av urea. 2. Aktiviteten av aldolas, hållen i en 0,5 M urealösning i en timme, ökar med 14,2 % ...

Frågan uppstår: sker partiell irreversibel inaktivering av enzymer här, eller gör det bara<...>urea upp till 1 M koncentration tror vi att det i en vattenlösning inte sker denaturering av enzymet, utan inaktivering<...>Det kan antas att denna kombination av molekyler till komplex skyddar enzymet från irreversibel inaktivering.<...>bildandet av aggregat sker en irreversibel inaktivering av glycerofosfatdehydrogenas, som är associerad<...>enzymatiska och fysikalisk-kemiska egenskaper.

Förhandsgranskning: STUDERA BEROENDE MELLAN FYSISK-KEMISKA FÖRÄNDRINGAR I NATIVA ENZYMPROTEINER OCH DERES KATALYTISKA AKTIVITET.pdf (0.0 Mb)

38

Grunderna i kemi och teknik för produktion och bearbetning av fetter. Del 1. Teknik för att få fram vegetabiliska oljor Läromedel

Ivanovo State University of Chemical Technology

Utbildningshandboken beskriver de förberedande operationerna för lagring och bearbetning av oljeväxter, tekniska operationer för att förbereda frön för oljeutvinning, anger de teoretiska och tekniska grunderna för framställning av vegetabiliska oljor genom pressning och extraktion, och tar upp frågorna om primär rening av den extraherade oljan. Avsedd för studenter inom specialitet 260401 Teknik för fetter, eteriska oljor och parfymer och kosmetiska produkter.

Förhållandena bör säkerställa minsta möjliga denaturering av proteiner och inaktivering av enzymer, avgiftning av oljekakor<...>Den innehåller hela uppsättningen enzymer som är karakteristiska för ett levande frö.<...>I detta fall inträffar inaktivering av enzymer från fosfolipasgruppen och enzymet lipas.<...>För neutralisering av oönskade ämnen och inaktivering av enzymer som katalyserar bildningsprocesserna<...>Det är svårare att uppnå inaktivering av enzymer och andra oönskade ämnen som finns i sojabönsfrön

Förhandsvisning: Grunderna i kemi och teknik för produktion och bearbetning av fetter. Del 1. Teknik för produktion av vegetabilisk olja.pdf (0,4 Mb)

39

BIOKEMISK FORSKNING AV AUTOLISERINGSPRODUKTER FÖR VINJÄST ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Moskva: ORDEN FRÅN LENIN INSTITUTE OF BIOCHEMISTRY UPPGIFT EFTER A. N. BAKH FRÅN USSR:s vetenskapsakademi

Syftet med och syften med forskningen. - att undersöka förändringen i aktiviteten av enzymer i jäst och vin under autolys; - att undersöka produkter av autolys, kvävehaltiga ämnen,

Efterföljande exponering resulterar i en lätt inaktivering av enzymet.<...>Dessa enzymer utsöndras huvudsakligen i vin.<...>Under värmebehandlingen, tillsammans med frisättningen av ", inaktiveras enzymer.<...>processer i. fenomenet termisk nedbrytning av kemikalier, termisk denaturering av proteiner, inaktivering<...>Under värmebehandling, tillsammans med överföringen av ämnen från jäst till vin, observeras inaktivering av enzymer

Förhandsvisning: BIOKEMISKA STUDIER AV AUTOLISERINGSPRODUKTER FÖR VINJÄST.pdf (0,0 Mb)

40

Detta arbete ägnas åt studien av ett ATP-reagens som innehåller mutant termostabilt luciferas av Luciola mingrelica eldflugor, luciferin, MgS0_4, komponenter i en buffertlösning och stabilisatorer och används allmänt för att bestämma nano- och pikomolära koncentrationer av adenosin-5 "-fosfat (ATP) i olika biologiska prover Utvärdering av aktiviteten, stabiliteten och analytiska egenskaperna hos ATP-reagenset i lösning i närvaro och frånvaro av 5 % gelatin och i gelatingel. Vid en gelatinkoncentration på 5 % och en temperatur > = 30 °, en ATP-reagenslösning erhålls och gelning sker under 30 °. Lösningar av ATP-reagenset studerades vid 30 °C och tunna gelatinfilmer med ATP-reagenset studerades vid 22 °C. Gelatintillsatser minskar aktiviteten och stabiliteten något luciferas. Detektionsgränserna var 2 * 10 (-12), 7 * 10 (-13), 7 * 10 (-14) M ATP vid användning av ett ATP-reagens i gelatinösa filmer och i lösning i närvaro av 5% gelatin respektive i dess frånvaro. Det har visat sig att lagring av ATP-reagenset vid 22°C i en gelatingel inte bara behåller den enzymatiska aktiviteten utan också skyddar enzymet från bakteriell kontaminering, vilket resulterar i en förlust av luciferasaktivitet.

Under denna tid var inaktiveringen av ATP-reagenset i bufferten endast 8 %.<...>De kinetiska kurvorna för inaktivering visar (fig. 2) att processen i alla fall fortsätter enligt den första<...>Vidare fortsätter inaktiveringen enligt den första ordningen.<...>Inaktivering av enzymet vid 4°C fortskred enligt den första ordningen och berodde inte på om enzymet fanns i bufferten.<...>Berezin I.V., Klyachko N.L., Levashov A.V. et al // Immobiliserade enzymer. M., 1987.

41

Nr 1 [Livsmedels- och processindustri. Abstrakt tidskrift, 2002]

1999 publicerades det första numret av abstrakttidningen "Livsmedels- och bearbetningsindustrin". Sedan 2000 har CNSHB publicerats kvartalsvis. Tidskriften är organ för aktuell information om inhemsk och utländsk litteratur om livsmedelsindustrin. Publikationen är avsedd för forskare, specialister och utövare av livsmedelsindustrin och kan fungera som en referensmanual för bibliotekarier och anställda vid vetenskapliga och tekniska informationsorgan. Den årliga volymen av RJ är cirka 1200 publikationer. Publikationen innehåller information om de mest betydelsefulla artiklarna från vetenskapliga och vetenskapligt-praktiska tidskrifter och samlingar som mottagits av Central National Agricultural Library och återspeglar världsdokumentärflödet inom alla grenar av livsmedelsindustrin.

C, enzymet är stabilt mellan 4 och 30 ° C, sedan sjönk stabiliteten och efter 60 ° C inträffade snabb inaktivering<...>till ofullständig inaktivering av PFO.<...>Det noterades att 1 och 2 inte orsakar inaktivering av enzymer, 3 är minimal och 4a och 4b inaktiverar selektivt<...>snabb inaktivering av PFO.<...>Det noterades att 1 och 2 inte orsakar inaktivering av enzymer, 3 är minimal och 4a och 4b selektivt

42

Biotekniska grunder för användning av mikrobiologiska syntespreparat för bearbetning av rått kött med reducerade funktionella och tekniska egenskaper monografi

Uppsatsen sammanfattar resultaten av många års forskning och systematiserar information som kännetecknar utsikterna och potentialen av att använda komplexa proteolytiska enzympreparat för att korrigera egenskaperna hos lågkvalitativa köttråvaror, såväl som för kött som har avvikelser i förloppet av autolytiska transformationer . Monografin utarbetades vid Institutionen för livsmedelsproduktionsteknologi vid Kazan State Technological University.

till substratet, och å andra sidan - resultatet av inaktivering av enzymet.<...>i livsmedelsindustrin är endast möjligt om det är helt inaktiverat i den färdiga produkten, eftersom<...>Som framgår av de erhållna resultaten (fig. 2.4) börjar inaktiveringen av enzymet vid pH 8,0 och intensivt<...>En ytterligare ökning av inkubationstemperaturen till 600C ledde till en fullständig

Syftet med denna studie var att studera effekten av växtmaterial som införts i den grå skogsmarken och dess fuktförhållanden på aktiviteten av redoxenzymer.

jord Sterilisering av jordprover med infört organiskt material \ -strålning ledde till fullständig inaktivering<...>i jordprover och för att fullborda inaktiveringen av enzympreparatet i kvartssand.<...>En betydande inaktivering av enzymet ägde rum i kvartssand.<...>Sterilisering av jorden genom γ-strålning och hög temperatur leder till fullständig inaktivering av dshydrogenaser,<...>Det har visat sig att inaktivering av preparat av katalas- och peroxidasenzymer införda i grå skogsmark

Därför är syftet med blanchering att inaktivera oönskade enzymer som finns i grönsaker,<...>Copyright OJSC "CDB" BIBCOM "& LLC" Agency Book-Service "61 nr. 10/2015 mellan temperatur och tid för inaktivering<...>dess form, storlek, struktur, mognadsgrad och speciellt på typen av enzymsystem som utsätts för inaktivering<...>används ibland vid låga temperaturer för att förbättra produktens textur genom selektiv inaktivering<...>Peroxidas är ett av de mest värmestabila enzymerna.

45

ARGINAS AV FRÖ VIKI MOHNATOY ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

M .: MOSKVA STATENS PEDAGOGISKA INSTITUTT UPPMÄNT EFTER V.I.LENIN

Slutsatser 1. Hydrolys av arginin i närvaro av arginaspreparat från vickerfrön endast under den initiala inkubationsperioden följer villkoren för en monomolekylär process. När reaktionen fortskrider ytterligare ligger de empiriska hastigheterna efter de som beräknats för första ordningens reaktionsvillkor.

för beräkning av konstanterna för enzyminhibering av reaktionsprodukten (orntin).<...>substrat och biobearbetning med reaktionsprodukter; 2) värmeinaktivering av enzymet under reaktionen.<...>Hela uppsättningen punkter definierar en kurva, och därför kan det antas att värmeinaktiveringen av enzymet<...>Eftersom det har visats att det inte sker någon termisk inaktivering av läkemedel under reaktionen, bör det antas<...>Inaktivering av växtarginas under den enzymatiska hydrolysen av arginin.

Förhandsvisning: ARGINASE SEEDS VIKI MOHNATOY.pdf (0,0 Mb)

46

Fria radikaler, som inkluderar aktiverade syremetaboliter och kväveoxid, med överdriven bildning, kan spela en betydande roll i förekomsten av patologiska tillstånd i reproduktionssystemet: endometrios, diffus mastopati, induktion av karcinogenes av olika lokaliseringar. Det finns bevis för att stödja rollen av oxidativ stress i kvinnlig infertilitet. Resultaten av prekliniska och kliniska studier bekräftar genomförbarheten av att använda antioxidanter för att förebygga och behandla dessa sjukdomar. Vitaminer A, C, E, på grund av deras tillgänglighet, prevalens i naturen, bättre kunskap och affinitet för människokroppen, ingår oftast i komplex terapi. Det finns en betydande evidensbas för effektiviteten av användningen av antioxidantvitaminer för behandling av sjukdomar i reproduktionssystemet. Den högre effektiviteten av komplex farmakoterapi med användning av antioxidanter förklaras inte bara av effekten på lipidperoxidation som en av länkarna i sjukdomens patogenes, utan också av en förändring i ämnesomsättningen av läkemedel som ordineras samtidigt med antioxidanter p.g.a. reduktionen av cytokrom P450 3A4. Elektrokemisk analys av den katalytiska aktiviteten av cytokrom P450 3A4 visade att vitamin A, C och E påverkar reduktionen av cytokrom P450 3A4 på grund av deras antioxidanteffekt.

Dessa processer styrs av enzymer som förhindrar läckage av reaktiva produkter.<...>en kränkning av dess reglerande funktioner i förhållande till de viktigaste processerna för cellulär metabolism: inaktivering<...>ROS kan interagera med cytokrom P450, vilket orsakar inaktivering av enzymet.<...>Vitamin C, E och betakaroten ger icke-enzymatisk AOD i kroppen på grund av inaktivering vid olika<...>Betakaroten, tillsammans med inaktivering vid olika nivåer av reaktiva syreämnen, kan återställas

47

REGLER OCH EGENSKAPER HOS RODOBACTER CAPSULATUS VITROGENASE SYSTEM ABSTRACT DIS. ... KANDIDAT FÖR BIOLOGISKA VETENSKAPER

Moskva: INSTITUTE OF MICROBIOLOGY OF THE ACADEMY OF SCIENCE i USSR

Syftet med detta arbete var att studera egenskaperna i regleringen av nitrohecassystemet hos den lila svavelfria bakterien Rhodobaoter capaulatua-stammen BIO

Följaktligen är övergången av denna bakterie nitrogevas till NGp-phyyu on inaktiveringen av enzymet som sådant.<...>Den väsentliga rollen av en inaktivering av nitrogenas, och Fd I av R. capaula "genom inaktivering av detta enzym / eftersom det behåller sin aktivitet. in vivo och inviSiw när de används<...>B. capulatua nitratreduktas är ett enzym av diosimilatorisk typ. åtta.<...>Produkterna

Förhandsvisning: REGLER OCH EGENSKAPER HOS RODOBACTER CAPSULATUS VITROGENASE SYSTEM.pdf (0,0 Mb)

48

Innehållet av fritt heparin i blodplasman hos patienter med polycytemi vera och frekvensen av neurologiska cerebrala symtom [Elektronisk resurs] / Gaidukova, Tkachenko, Bubliy // Hematology. Transfusiologi. Östeuropa .- 2016 .- №1 .- S. 47-57 .- Åtkomstläge: https: // webbplats / efd / 478925

Relevans. Polycythemia vera (PV) är en sjukdom från gruppen myeloproliferativa neoplasier, vars kliniska manifestationer kännetecknas av blödningsbenägenhet och trombos. Material och metoder. Trettiotvå patienter med PV undersöktes. Bland de undersökta patienterna fanns 18 män och 14 kvinnor. Medelåldern för de undersökta patienterna var 57,2 ± 1,2 år. Den andra observationsgruppen bestod av 52 patienter undersökta i samband med misstänkta myeloproliferativa blodsjukdomar, men efter en noggrann klinisk och hematologisk undersökning uteslöts sådana sjukdomar från dem, och det perifera blodets tillstånd betraktades som absolut SE, på grund av förekomsten. vissa somatiska sjukdomar. Bland de undersökta patienterna fanns 30 män och 22 kvinnor. Medelåldern för patienter i grupp 2 var 55,7 ± 3,6 år. Kontrollgruppen bestod av 35 till synes friska individer i samma ålder. Den kvantitativa bestämningen av innehållet av den fria fraktionen av heparin utfördes genom elektroforetisk analys enligt metoden enligt B.V. Mikhailichenko, S.V. Vydybortsa (2000). Resultat och slutsatser. Hos PI-patienter observeras en obalans i utbytet av fritt heparin, vilket manifesteras av en ökning av dess innehåll i blodplasman. Diskussionen presenterar data om heparinets fysiologiska roll. Det har visat sig att dess verkan inte bara är i regleringen av hemostas, utan också i kontrollen av angiogenes, immunreaktioner, reglering av fett- och kolhydratmetabolism, antibakteriell, antiviral och antiinflammatorisk aktivitet. Möjliga mekanismer för uppkomsten av de identifierade kränkningarna diskuteras.

Först och främst tar arbetet upp följande frågor: 1. Förändras egenskaperna hos RNA-polymeras när det kombineras med DNA redan innan RNA-syntesen påbörjas? 2. Vad är stabiliseringen av polymeras i närvaro av DNA och NTF associerad med: med initieringsakten, dvs. kopplingen av den första NTF, med syntesen av långa kedjor av polynukleotider, eller med den stabiliserande effekten av NTF på RNA-polymeras, som inte är associerad med kopplingen av nukleotider till varandra. 3. Har bevarandet av storleken och den dubbelsträngade naturliga strukturen av mall-DNA betydelse för stabiliseringen av polymeras under RNA-syntes?

Inkubationsbetingelser d I fritt enzym; 2 enzym + DNA) 3 enzym + DNA + NTF.<...>Tabell 7 Inaktivering av trypsino-RNA-polymeras beroende på betingelserna för dess förinkubation Under förinkubation<...>Detta resultat, samt information om inaktivering

Arbetet studerade effekten av verkan av hög skadlig temperatur (45 ° C) under två och tolv timmar på växterna G. max och G. soja på förändringen i de elektroforetiska spektra av peroxidas och katalas. Kvantitativa och kvalitativa förändringar i bladens elektroforetiska spektra orsakade av värmestress berodde på genotyp, utvecklingsfas för sojabönor och varaktigheten av stressfaktorn. Det visades att kortvarig temperaturstress inte leder till kvantitativa förändringar i de elektroforetiska spektra av peroxidas och katalas i sojabönblad. Långvarig exponering för höga skadliga temperaturer orsakar inaktivering främst av former av peroxidas och katalas med medelhög elektroforetisk rörlighet. Stabila former av peroxidas med Rf 0,02; 0,10; 0,21 (G. max) och Rf 0,02; 0,10; 0,40 (G. soja), katalaser med Rf 0 ... 0,04 (G. max) och Rf 0 ... 0,04; 0,22 ... 0,24 (G. soja), såväl som stillasittande former som aktiveras vid höga temperaturer, säkerställer att växter fungerar under stress

Långvarig exponering för höga skadliga temperaturer orsakar inaktivering av huvudsakligen peroxidasformer<...>Långvarig exponering för värmechock leder till enzyminaktivering.<...>I mekanismerna för termisk anpassning av sojabönor spelas en viktig roll av flera molekylära former av enzymer.<...>Exponering för hög skadlig temperatur under tolv timmar orsakar huvudsakligen inaktivering<...>Enzymers roll i växtresistens / K.N. Sarsenbaev, F.A. Polimbetova // Science Academy of the Kazakh SSR, Main bot. trädgård.

Med tanke på effektiviteten av användningen av biokatalysatorer skulle det vara extremt frestande inte bara att öka stabiliteten hos enzymer, utan också att lära sig hur man återför aktiviteten till enzympreparaten som spenderas under den tekniska processen.

Nästan samtidigt med upptäckten av fenomenet enzyminaktivering (början av 1900-talet) började forskare göra försök att återaktivera dem. Vid det här laget har det samlats en hel del positiva exempel i denna riktning. Det är bekvämt att klassificera dem enligt orsakerna till inaktivering.

Reaktivering av aggregerade proteiner... Det uppnås ofta genom att förstöra intermolekylära icke-kovalenta kontakter (hydrofoba, elektrostatiska, vätebindningar). För detta används samma denatureringsmedel som förstör icke-kovalenta interaktioner i naturliga proteiner, vilket orsakar deras reversibla denaturering: koncentrerade lösningar av urea och guanidinklorid, extrema pH-värden, etc.

Reaktivering av proteiner med förändrad primärstruktur... Om proteinet har förlorat sin aktivitet som ett resultat av kemisk modifiering av funktionella grupper, kan du försöka återaktivera det med en omvänd kemisk reaktion. Enzymer som inaktiverats genom att modifiera SH-grupper (till exempel genom att oxidera dem) kan ibland återaktiveras genom att tillsätta ett överskott av en tiol med låg molekylvikt eller annat reduktionsmedel.

Desorption av inaktiverat protein från kärlväggarna... "Sorptionsinaktivering" av proteiner beror på svaga icke-kovalenta interaktioner (elektriska, hydrofoba, vätebindningar) mellan proteinet och reaktionscellens yta. Reaktivering i detta fall uppnås på grund av förstörelsen av ospecifika interaktioner vid extrema pH-värden, under inverkan av koncentrerade lösningar av urea eller guanidinklorid och andra reagens som är "reversibla denatureringsmedel" för de flesta proteiner.

Reaktivering av "irreversibelt denaturerat" protein... Reaktivering kan utföras med följande tvåstegsschema: först ska allt i det inaktiverade proteinet förstöras, inklusive icke-nativa icke-kovalenta interaktioner, dvs överföra proteinet till ett ovikt tillstånd och från detta tillstånd försöka vika det till en inhemsk konformation. Sålunda, i det allmänna fallet, kommer problemet med reaktivering av något "irreversibelt denaturerat" enzym i huvudsak att falla ner till lösningen av två problem. Först, sökandet efter förhållanden under vilka det inaktiverade proteinet kan vecklas ut. För utveckningen av inaktiverade proteiner används vanligtvis samma reagens, med hjälp av vilka naturliga (icke-inaktiverade) proteiner kan överföras till tillståndet av en statistisk härva. Dessa är koncentrerade lösningar av reversibla denatureringsmedel (urea eller guanidinklorid). För det andra, det experimentella urvalet av förhållanden under vilka det oveckade proteinet framgångsrikt viker sig till den naturliga (katalytiskt aktiva) konformationen. För detta ändamål är effektorerna för enzymatisk aktivitet (substrat, inhibitorer, kofaktorer, etc.) ofta användbara, som samtidigt är vikningseffektorer, dvs de ökar utbytet av enzymreaktivering.

Regenerering av kofaktorer (koenzymer)

Kategorin av kofaktorer inkluderar koenzymer, protesgrupper och metalljoner. Ur teknisk synvinkel är det mest intressanta regenereringen av koenzymer. Koenzymer är organiska föreningar med låg molekylvikt som spelar rollen som ett ytterligare substrat i många enzymers funktion.

När man använder system av immobiliserade enzymer med koenzymer måste två problem lösas: den faktiska regenereringen av koenzymet och dess retention i reaktionssystemet. Det senare åstadkoms vanligtvis genom kovalent immobilisering av koenzymer på polymerbärare. Flera metoder har utvecklats för regenerering, vars kärna återspeglas i följande schema:

Enligt detta schema regenereras ett koenzym som förändras i en reaktion med deltagande av ett av enzymerna, tack vare systemet med konjugerade reaktioner, d.v.s. tar sitt ursprungliga skick. Beroende på typen av konjugatreaktion kan alla metoder för regenerering av koenzymer delas in i två grupper: enzymatiska och icke-enzymatiska. Enzymatiska metoder inkluderar regenereringsmetoder med användning av konjugerade substrat eller konjugerade enzymer. Icke-enzymatiska vägar kan delas in i kemiska och elektrokemiska.

ATP-regenereringssystemÄr en kontinuerlig process för att omvandla ADP till ATP, katalyserad av enzymer som fosforylerar difosfat, med användning av fosfatinnehållande föreningar (acetylfosfat, kreatinfosfat, argininfosfat, etc.) som fosfatdonatorer.

Avslappningsmetoder är baserade på principen att med en snabb yttre påverkan på systemet (förändring i temperatur, tryck, etc.), beror tiden det tar för systemet att nå en ny jämvikt (eller stationärt tillstånd) på hastigheten av kemisk reaktion (och ibland på diffusionshastigheten för reagenser ...

Betrakta den enklaste reaktionen av komplexbildning av enzymets aktiva ställe med liganden

I början är systemet i jämvikt, vilket kännetecknas av jämviktskonstanten K 0 =K(T 0) och följaktligen jämviktskoncentrationer ,,
... Antag att temperaturen i systemet ändras kraftigt T->T 0 +T... Detta leder till en förändring av jämviktskonstanten K->K 0 +K, som bestäms av relationen

(2.50)

var  H- standardentalpiändring. Därefter går systemet över till ett nytt jämviktstillstånd:

(2.51)

(2.52)

Ekvation (2.51) är olinjär. Antag att avvikelsen från jämvikt är liten och då

och ekvation (2.51) omvandlas till en linjär differentialekvation:

Lösning på denna differentialekvation:

Kvantiteten

(2.54)

kallas avkopplingstid.

2.5. Inverkan av temperatur och pH på hastigheten av enzymatiska reaktioner

Inverkan av dessa faktorer på hastigheten av en elementär kemisk reaktion övervägdes i kapitel 1. Det speciella är att enzymatiska reaktioner är komplexa flerstegsreaktioner (bestående av många elementära reaktioner). Dessutom kännetecknas tillståndet för enzymmolekyler i lösning av en uppsättning konformers som reversibelt omvandlas till varandra. Konformationsövergångarna för en molekyl bestäms till stor del av lösningens temperatur och pH.

2.6. Hämning av enzymatiska reaktioner

Ämnen som hämmar enzymers katalytiska aktivitet kallas inhibitorer ... Det finns två huvudklasser av inhibitorer - reversibel

(2.55)

(bekämpningsmedel, sarin, soman, aspirin, etc.)

och irreversibel (inaktiverare )

(2.55)

(kolmonoxid, cyanidjon, analgin, etc.)

2.7. Enzyminaktivering

Biopolymermolekyler (enzymer) är termodynamiskt instabila och ändrar i regel sin struktur och egenskaper över tid. I de flesta fall kan inaktiveringsprocessen beskrivas som en övergång mellan två tillstånd av det aktiva enzymet. E a och inaktiva E i :

(2.56) Processens kinetik beskrivs av motsvarande differentialekvation

(2.57)

och kännetecknas av en tidskonstant

(2.58)

Processen för inaktivering av enzymet kan ha en annan fysikalisk-kemisk natur. Den vanligaste är termisk denaturering, vilket är en betydande omstrukturering av makromolekylen, en förändring i den tertiära och delvis sekundära strukturen.

För inaktiveringsändamål kan kavitationsultraljud, radioaktiv strålning etc. användas.

En förändring i pH kan också leda till denaturering av enzymet. Vid varje pH-värde kännetecknas proteinet av en motsvarande laddningsfördelning (jonogena grupper). Vid mycket lågt eller mycket högt pH kan fördelningen av laddningar avsevärt polarisera molekylen, leda till uppkomsten av isomerer och irreversibelt överensstämma med förstörelsen av det aktiva centrets struktur. Till exempel:

Denaturering av enzymet orsakas och denatureringsmedel, förstör den sekundära strukturen av protein (till exempel urea), såväl som oxidativa processer med deltagande av syre.

Vid studiet av sådana processer har viktig information erhållits genom avslappningsmetoder. Som regel åtföljs konformationsförändringar av en förändring i miljön av aromatiska aminosyror - tyrosin och tryptofan (absorptionsband vid 290 nm). Detta visar sig i en förändring i absorptions- och fluorescensspektra.

Reversibla konformationsförändringar inträffar vanligtvis med en tid på 0,1-100 ms, och irreversibla - 1-1000 min.

Exempel 1. Det enklaste kinetiska schemat för inaktivering med jämvikt mellan konformer:

(2.59)

Processens kinetik beskrivs av en karaktäristisk tidpunkt

(2.60)

Exempel 2. Båda konformatorerna är mottagliga för inaktivering:

(2.61)

(2.62)

Exempel 3. Ett mer allmänt fall för ett system som involverar n konformers:

Ofta bildar enzymer i lösning dimerer, och i den dimera formen är de mer stabila. Sedan finns det dissociativ inaktiveringsmekanism :

(2.65)

Följande schema återspeglar de möjliga mekanismerna för inaktivering under reaktionen (monomolekylär inaktivering av den fria formen av enzymet, monomolekylär inaktivering av enzym-substratkomplexet, bimolekylär inaktivering av enzymet av substratet, bimolekylär inaktivering av enzymet av produkten) :

(2.66)

Diskriminering av inaktiveringsmekanismer och bestämning av reaktionens kinetiska egenskaper utförs vanligtvis med flera metoder:

analysera beroendet av produktutbytet på koncentrationen av enzymet;

upprättande av ett samband mellan graden av omvandling av substratet och graden av inaktivering av enzymet;

att utföra reaktionen vid låga omvandlingsgrader av substratet och låga koncentrationer av enzymet;

att utföra reaktionen vid höga koncentrationer av enzymet;

förinkubation av enzymet med reaktionskomponenterna;

användning av integralreaktionsekvationer.